采用SELDI技術篩選乳腺癌新輔助化療療效相關的蛋白譜.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   本研究旨在應用生物大分子表面加強的激光解析/電離化時間—飛行質譜儀結合配套的蛋白質芯片技術檢測乳腺癌新輔助化療前后癌組織內蛋白質譜的變化,篩選新輔助化療療效相關的蛋白譜。進一步探索由于TNM分期、患者年齡、淋巴結轉移狀況及ER、PR、HER-2等的差異對新輔助化療的影響。比較臨床有效組與無效組之間蛋白峰差異,進而篩選有療效預測價值的相關蛋白譜。
   方法:
   64例乳腺癌患者入組,于新輔助化療

2、前行粗針穿刺獲得乳腺癌組織,采用FEC方案或ET方案(氟尿嘧啶500mg/m2,第1天;表阿霉素100mg/m2,第1天;環(huán)磷酰胺500mg/m2,第1天;或表阿霉素75ms/m2,第1天;多西他賽80mg/m2,第1天;兩方法均為每3周重復)化療3-4個周期后手術治療,術中取樣。所取樣本分裝后,一部分在液氮中快速冷凍后放入-80℃凍存,另一部分經福爾馬林固定后準備做免疫組化染色。取適量樣品在液氮中研磨,利用蛋白提取試劑盒提取組織蛋白,

3、采用K5600檢測蛋白濃度。組織蛋白液經處理后上機得到質譜圖,所得數據采用Biomarkerwizard軟件分析,得到蛋白峰度值。新輔助化療前后的峰度值分別根據TNM分期分為Ⅱ和Ⅲ級兩組,患者年齡≤50歲和>50歲兩組,淋巴結轉移≤4個和>4個淋巴結兩組及ER、PR、HER-2陰性及陽性等分為兩組,后利用SPSS17.0進行統(tǒng)計學分析。新輔助化療療效評估根據RECIST標準,將新輔助化療患者分為有效組與無效組,并比較化療前兩者間的蛋白譜

4、差別。
   結果:
   采用Mann-Whitney秩和檢驗,得出化療前后差異蛋白峰5825.89Da、8949.50Da、11053.48Da、11652.02Da、17898.94Da、22250.63Da、38546.56Da。以上7個蛋白峰化療后均較化療前增高。有效組和無效組比較得出差異蛋白峰5360、9089、10528、13445、15118、44065Da。在TNM分期、年齡、癌灶大小、淋巴結轉移情況及

5、ER、PR、HER-2的分類中,8949.50Da、17898.94Da、38546.56Da等峰表現出差異?;熐昂竺庖呓M化染色變化明顯的有18例,將其與無明顯變化的46例比較,其中38546.56Da在兩組患者化療前的樣本中有差異,8949.50Da及17898.94Da在兩組患者化療后的樣本中有差異。
   結論:
   1.采用SELDI技術能夠篩選到新輔助化療相關差異峰,結合臨床療效可篩選到新輔助化療療效的預測

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