1、血清和糖皮質激素誘導蛋白激酶(serum and glucocorticoid inducible proteinkinase，SGK)是一種新發(fā)現(xiàn)的絲/蘇氨酸蛋白激酶，與其他蛋白激酶主要在酶活性水平上受翻譯后的磷酸化和去磷酸化調控顯著不同的是，SGK1的轉錄、活性以及亞細胞定位受到不同胞內和胞外刺激因素的調節(jié)，是多種胞內信號途徑的功能性交匯點，參與了細胞增殖、滲透調節(jié)、離子通道調節(jié)以及細胞生存和/或凋亡應答等過程，與糖尿病腎病、高血壓

2、等疾病密切相關。 然而，SGK1在信號轉導通路中的分子機制還不是很清楚，其底物的發(fā)現(xiàn)也很有限。尤其SGK1的亞細胞定位研究仍存在很多爭議，在細胞內表達外源的SGK1與細胞內源表達的SGK1的亞細胞定位也存在差異。因此，SGK1的亞細胞定位仍是值得深入探討的問題，研究SGK1的亞細胞定位有利于進一步研究SGK1的底物以及其在各種細胞活動中所擔任的角色和作用機制。在本文的研究中，我們通過免疫細胞化學，western blot，以及基

3、因沉默(RNAi)等技術檢測了小鼠腎內髓質集合管上皮細胞(mouse inner medullary collecting duct，mIMCD3)中內源表達的SGK1的亞細胞定位情況，同時構建了帶有Flag標簽的SGK1表達載體sgk1-Flag-pCMV5，通過免疫細胞化學和核漿分離等技術檢測了外源SGK1在mIMCD3細胞中的分布情況。結果證明了在mIMCD3細胞中內源表達的SGK1定位于細胞核中，外源表達的SGK1在細胞質和細胞

4、核都有分布，然主要還是分布于細胞核中。并且，我們發(fā)現(xiàn)了在mIMCD3細胞中，高鹽培養(yǎng)環(huán)境可誘導SGK1的高表達。 醛糖還原酶(aldose redutase，AR)作為多元醇糖代謝通路中的限速酶，在糖尿病腎病中起著重要作用。近幾年來的研究也證實SGK1參與了糖尿病腎病的發(fā)生。然而，關于AR與SGK1之間是否存在關系的研究迄今仍未見報道。我們利用AR的化學酶抑制劑(zopolrestat，ARI)和AR siRNA，通過免疫細胞化