1、研究課題:
　　 魚(yú)腥草治療孕婦巨細(xì)胞病毒感染的臨床及實(shí)驗(yàn)研究。
　　 研究目的：
　　 探討中藥魚(yú)腥草治療人巨細(xì)胞病毒(HCMV)感染的療效。運(yùn)用高效液相色譜法(HPLC法)測(cè)定臨床治療孕婦巨細(xì)胞病毒感染的魚(yú)腥草抗病毒有效成分槲皮素的含量。研究魚(yú)腥草抗病毒有效成分槲皮素體外抗人巨細(xì)胞病毒(HCMV)的作用及其作用機(jī)制。
　　 研究設(shè)計(jì)：
　　 選用2007年12月-2009年6月，華中科技大學(xué)同

2、濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院(武漢市第一醫(yī)院)婦產(chǎn)科門診孕婦1900例進(jìn)行篩查，檢測(cè)血清中人巨細(xì)胞病毒HCMV-IgG、IgM，發(fā)現(xiàn)HCMV-IgM陽(yáng)性者60例作為研究對(duì)象。分組給予魚(yú)腥草煎劑及金葉敗毒顆粒進(jìn)行治療14天后，復(fù)查HCMV-IgM轉(zhuǎn)陰率。運(yùn)用高效液相色譜儀測(cè)定魚(yú)腥草抗病毒有效成分槲皮素的含量，并采用細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方法研究槲皮素體外抗人巨細(xì)胞病毒(HCMV)的作用及其作用機(jī)制。
　　 治療和觀察方法：
　　 1.

3、將HCMV-IgM陽(yáng)性者60例按隨機(jī)數(shù)字表法分組：對(duì)照組30例，治療組30例。對(duì)照組用金葉敗毒顆粒(武漢中聯(lián)藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)，組成：大青葉、蒲公英、金銀花、魚(yú)腥草，每袋10g)治療，每日3次，每次1袋；治療組用魚(yú)腥草草藥30g，由武漢市第一醫(yī)院煎藥室統(tǒng)一煎制而成，每袋200ml.一次口服一袋，每日兩次，均服用14天。停藥1周后無(wú)菌抽取肘靜脈血4 ml，取血清于-20℃保存，復(fù)查HCMV-IgM轉(zhuǎn)陰率。
　　 2.觀察各治

4、療組治療后HCMV-IgM陽(yáng)性轉(zhuǎn)陰率，采用ELISA法檢測(cè)，試劑HCMV-IgG、IgM，ELISA試劑盒購(gòu)自美國(guó)Hope公司。
　　 3.HPLC法測(cè)定魚(yú)腥草抗病毒有效成分槲皮素的含量：采用AgilentZORBAX ODS色譜柱，以甲醇-0.4％磷酸(52∶48)為流動(dòng)相；368nm波長(zhǎng)處檢測(cè)，流速：1.0ml·min-1，柱溫：30℃。
　　 4.用魚(yú)腥草抗病毒有效成分槲皮素配成不同濃度的溶液，噻唑藍(lán)比色法(MTT

5、)檢測(cè)細(xì)胞毒性，槲皮素不同濃度溶液分別作用于被HCMV感染的細(xì)胞，通過(guò)觀察細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)，MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率來(lái)探討槲皮素對(duì)HCMV感染的細(xì)胞治療作用、對(duì)HCMV在細(xì)胞內(nèi)增殖的抑制作用及預(yù)防作用，從而對(duì)其抗病毒機(jī)制進(jìn)行研究。
　　 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：
　　 臨床觀察計(jì)量資料數(shù)據(jù)均輸入SPSS13.0軟件作t檢驗(yàn)及x2檢驗(yàn)。
　　 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。
　

6、　 結(jié)果：
　　 1.對(duì)照組用藥前后HCMV-IgM轉(zhuǎn)陰率73.3％，P＜0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療組用藥前后HCMV-IgM轉(zhuǎn)陰率70.0％，P＜0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療組與對(duì)照組相比較，u=0.2837，P＞0.05，差異無(wú)顯著性。
　　 2.HPLC法測(cè)定魚(yú)腥草抗病毒有效成分槲皮素的含量：線性范圍為0.24-1.20μ g，相關(guān)系數(shù)r=0.9973，平均回收率為98.75％，RSD=0.66％。

7、r>　　 3.槲皮素的半數(shù)中毒濃度為{TC50}4.75mg/ml，對(duì)HCMV在細(xì)胞內(nèi)增殖的治療作用及預(yù)防作用的半數(shù)有效濃度{EC50}分別為0.30 mg/ml和0.25mg/ml，治療指數(shù)為{TI}15.83。
　　 結(jié)論：
　　 孕婦感染巨細(xì)胞病毒后自然轉(zhuǎn)陰率大約在40％左右，這將會(huì)導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)和經(jīng)產(chǎn)道感染巨細(xì)胞病毒，造成孕婦流產(chǎn)、早產(chǎn)，胎兒畸形及出生缺陷等嚴(yán)重后果。中藥魚(yú)腥草治療孕產(chǎn)婦人巨細(xì)胞病毒感染療效顯著，