1、目的:
　　構建結核分枝桿菌感染RAW264.7巨噬細胞的模型,探討不同毒力的結核分枝桿菌感染對巨噬細胞凋亡的調(diào)控作用及其機制。
　　方法:
　　1.用結核分枝桿菌國際標準強毒株H37Rv株和卡介苗BCG分別感染巨噬細胞RAW264.7株,同時設空白對照組,在感染后1h、6h、12h及24h,用流式細胞技術檢測各組巨噬細胞的凋亡率,分析其時相性變化。
　　2.應用Westernblot和RT-PCR技術檢測上述各

2、組各時間點Caspase-3及Bcl-2蛋白表達水平(蛋白水平和基因水平)。
　　結果:
　　1.結核分枝桿菌感染組的凋亡率顯著高于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);BCG感染組早期凋亡率高于H37Rv株感染組,在感染后1h、12h和24h凋亡率升高顯著,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　2.結核分枝桿菌感染巨噬細胞后,其Caspase-3蛋白表達增高,結核分枝桿菌感染組的Caspase-3蛋白表達高

3、于對照組,對照組　　3.結核分枝桿菌感染組Caspase-3基因相對表達量高于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);BCG感染組Caspase-3基因表達高于H37Rv株感染組,在感染后1h和24h表達顯著增高

4、,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　4.結核分枝桿菌感染組的Bcl-2蛋白表達低于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);H37Rv感染組在1h、6h和24h的Bcl-2蛋白表達高于BCG感染組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　5.結核分枝桿菌感染組Bcl-2基因相對表達量低于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);H37Rv株感染組Bcl-2基因表達高于BCG感染組,在感染后1h、12h和24h的

5、相對表達顯著增高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　結論:
　　1.巨噬細胞感染結核分枝桿菌后凋亡率增高,其凋亡與結核分枝桿菌的毒力強弱有關,胞的凋亡水平存在差異,毒力弱的結核分枝桿菌感染的巨噬細胞早期凋亡顯著。
　　2.不同毒力的結核分枝桿菌感染巨噬細胞的Caspase-3表達水平存在差異,弱毒力結核分枝桿菌感染的巨噬細胞早期的Caspase-3表達水平更顯著。
　　3.不同毒力的結核分枝桿菌感染巨噬細