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文檔簡介
1、目的:
1.觀察多發(fā)性肌炎患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞各自所占CD4+T細(xì)胞的比例以及Th17/Treg免疫平衡的變化,探討Th17細(xì)胞與Treg細(xì)胞免疫失衡與多發(fā)性肌炎的關(guān)系;
2.觀察糖皮質(zhì)激素治療前后多發(fā)性肌炎患者Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞表達(dá)含量的變化情況,探討糖皮質(zhì)激素治療對Th17/Treg平衡的影響,預(yù)測糾正Th17/Treg免疫失衡對于未來多發(fā)性肌炎的治療價(jià)值;
3.觀察
2、RORγt mRNA和Foxp3 mRNA在多發(fā)性肌炎患者肌肉組織中表達(dá)含量的變化,以探討Th17/Treg免疫失衡在多發(fā)性肌炎發(fā)病中的作用。
方法:
1.本文共納入研究對象58例,分4組,其中,21例為多發(fā)性肌炎,10例為皮肌炎,10例為肢帶型肌營養(yǎng)不良2B型(LGMD2B)及17個(gè)為健康對照者;前三組患者均經(jīng)臨床、肌電圖、肌肉酶組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)技術(shù)檢查符合相應(yīng)的疾病診斷標(biāo)準(zhǔn),后一組來源于志愿者。所有病例均詳
3、細(xì)收集其臨床資料,包括主要臨床癥狀體征、既往用藥干預(yù)情況、血清肌酶譜值、肌電圖檢查結(jié)果、CT及MRI等影像學(xué)檢查結(jié)果等,并經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理分析;
2.①以多發(fā)性肌炎患者(n=21)和健康對照者(n=17)為研究對象,利用流式細(xì)胞儀檢測外周血單個(gè)核細(xì)胞中Th17和Treg細(xì)胞各自所占CD4+T細(xì)胞的比例,統(tǒng)計(jì)分析對照兩組之間Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞各自的含量差異;②利用肌電圖檢查結(jié)果將21名多發(fā)性肌炎患者分為活動期組(n=11)與
4、穩(wěn)定期組(n=10),對照兩組間Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞的比例是否存在差異;③選擇3例未經(jīng)藥物干預(yù)的新發(fā)首診多發(fā)性肌炎患者,觀察糖皮質(zhì)激素干預(yù)前后Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞比例變化趨勢;
3.利用RT-PCR技術(shù)檢測10例多發(fā)性肌炎組、10例皮肌炎組和10例LGMD2B組(對照組)的肌肉組織所表達(dá)RORγt mRNA和Foxp3 mRNA的相對量,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
結(jié)果:
1.在21例多發(fā)性肌炎患者中,男
5、性8例(38.1%),女性13例(61.9%);中位病程4個(gè)月;臨床主要表現(xiàn)為21例有近端肢帶肌受累,7例頸肌受累,2例咽喉肌受累,8例伴肌痛;血清CK平均值為3240.79±3139.89 IU/L,LDH平均值676.01±373.83IU/L。10例皮肌炎患者中,男性4例(40%),女性6例(60%);中位病程為6個(gè)月;臨床主要表現(xiàn)為10例均有皮疹及對稱性近端肢帶肌受累,頸肌受累9例,累及咽喉肌1例,伴肌痛4例;血清CK平均值為3
6、035.66±3032.48 IU/L;LDH平均值533.49±273.53IU/L。10例肢帶型肌營養(yǎng)不良2B型患者中,男性7例(70%),女性3例(30%);中位病程66個(gè)月;主要臨床癥狀為10例患者均有骨盆帶肌和(或)肩胛帶肌的無力,伴肌肉萎縮4側(cè);血清CK平均值為6196.37±4968.39IU/L, LDH平均值669.05±620.16IU/L。
2.①Th17細(xì)胞在多發(fā)性肌炎組的比例(1.21%±0.35%)
7、高于正常對照組(0.67%±0.32%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0001);Treg細(xì)胞在多發(fā)性肌炎組的比例(4.38%±1.31%)低于正常對照組(6.13%±1.54%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0006<0.05);
?、诙喟l(fā)性肌炎活動期組Th17細(xì)胞所占的比例(1.36%±0.33%)高于多發(fā)性肌炎穩(wěn)定期組(1.03%±0.25%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0138<0.05);Treg細(xì)胞所占CD4+T細(xì)胞的比
8、例在多發(fā)性肌炎活動期組(4.18%±1.33%),在多發(fā)性肌炎穩(wěn)定期組的比例(4.62%±1.32%),兩組無顯著性差異(P=0.4313,>0.05)。
③3例新發(fā)首診多發(fā)性肌炎患者在糖皮質(zhì)激素干預(yù)前的Th17細(xì)胞比例為1.43%±0.12%,干預(yù)后的比例為0.9%±0.1%,結(jié)果提示干預(yù)后Th17細(xì)胞比例有下降趨勢;同樣的,糖皮質(zhì)激素干預(yù)前的Treg細(xì)胞比例平均值為2.93%±0.15%,干預(yù)后為4.00%±0.61%,結(jié)
9、果提示干預(yù)后的Treg細(xì)胞比例有上升趨勢。
3.多發(fā)性肌炎組的RORγ t mRNA表達(dá)水平(1.06±0.10)分別與皮肌炎組(1.06±0.15)和LGMD2B組(0.89±0.05)相比,均無顯著性差異(P=0.48>0.05,P=0.61>0.05);多發(fā)性肌炎組的Foxp3 mRNA表達(dá)水平(1.19±0.29)分別與皮肌炎對照組(0.21±0.04)和LGMD2B對照組(0.75±0.09)相比,也無顯著性差異(P
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