神經(jīng)生長(zhǎng)因子和銀杏達(dá)莫預(yù)處理對(duì)乳鼠離體腦片谷氨酸和過氧化氫不同損傷保護(hù)作用的比較研究.pdf_第1頁(yè)
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1、貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文《中國(guó)圖書資料分類法》分類號(hào):R743.31單位代碼:10660學(xué)號(hào):S0100365貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院20132013屆碩士學(xué)位論文屆碩士學(xué)位論文神經(jīng)生長(zhǎng)因子和銀杏達(dá)莫預(yù)處理對(duì)乳鼠離神經(jīng)生長(zhǎng)因子和銀杏達(dá)莫預(yù)處理對(duì)乳鼠離體腦片谷氨酸和過氧化氫不同損傷保護(hù)作體腦片谷氨酸和過氧化氫不同損傷保護(hù)作用的比較研究用的比較研究研究生:研究生:陳廣福陳廣福導(dǎo)師:師:王迪芬王迪芬劉懷清劉懷清盧建明盧建明年級(jí):級(jí):20

2、102010級(jí)專業(yè):業(yè):麻醉學(xué)麻醉學(xué)20132013年5月1日貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2013屆碩士研究生論文2神經(jīng)生長(zhǎng)因子和銀杏達(dá)莫預(yù)處理對(duì)乳鼠離體腦片過氧化氫和谷氨酸神經(jīng)生長(zhǎng)因子和銀杏達(dá)莫預(yù)處理對(duì)乳鼠離體腦片過氧化氫和谷氨酸不同損傷保護(hù)作用的比較研究不同損傷保護(hù)作用的比較研究專業(yè):麻醉學(xué)(重癥醫(yī)學(xué))姓名:陳廣福導(dǎo)師:王迪芬劉懷清盧建明摘要摘要【目的】【目的】:摸索和熟練掌握乳鼠離體腦片的培養(yǎng)技術(shù);建立離體腦片谷氨酸(Glu)和過氧化氫(H202)

3、的損傷模型;探討神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)和銀杏達(dá)莫預(yù)處理對(duì)乳鼠離體腦片Glu和H202損傷的保護(hù)作用及這種保護(hù)作用是否有差異性。【方法方法】:取7天新生乳鼠皮層切成400μm厚度腦片置于有微孔膜的插入式培養(yǎng)皿內(nèi)同時(shí)放入37℃5%CO2、95%空氣的標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)箱內(nèi)保持腦片在氣液界面上進(jìn)行培養(yǎng)。腦片培養(yǎng)成功后隨機(jī)分為七組:A組(正常對(duì)照組),B組(Glu損傷組),C組(H202損傷組),D組(NGF預(yù)處理Glu損傷組)、E組(NGF預(yù)處理H20

4、2損傷組)、F組(銀杏達(dá)莫預(yù)處理Glu損傷組)、G組(銀杏達(dá)莫預(yù)處理H202損傷組)共7組(每組12個(gè)樣本)。NGF預(yù)處理組以最佳濃度50ugL進(jìn)行預(yù)處理。銀杏達(dá)莫預(yù)處理組以最佳濃度40mgL進(jìn)行預(yù)處理。D組和E組以50ugLNGF預(yù)處理24h后分別以1mmolLGlu和0.1mmolLH202損傷30分鐘,F(xiàn)組和G組以40mgL銀杏達(dá)莫預(yù)處理組24h后分別以1mmolLGlu和0.1mmolLH202損傷30分鐘,將所有分組換正常培養(yǎng)

5、基繼續(xù)培養(yǎng)72h后觀察。觀察指標(biāo)為:顯微鏡下腦片形態(tài)學(xué)觀察;HE染色后腦片組織內(nèi)細(xì)胞形態(tài)變化及透射電鏡下細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化;235氯化三苯基四氮唑(TTC)染色比色法測(cè)定各組腦片組織損傷率變化;檢測(cè)乳酸脫氫酶(LDH)漏出率;使用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)記物熱休克蛋白70(HSP70)陽(yáng)性表達(dá)的變化?!窘Y(jié)果】:【結(jié)果】:1.顯微鏡下培養(yǎng)腦片逐漸變薄向外遷移傾向、細(xì)胞形態(tài)完整、存活良好;A組HE染色腦片層次清楚,神經(jīng)元數(shù)量多、密度大,

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