1、目的：揭示抗癌活性肽(ACBP)對人結腸癌HT-29細胞凋亡的影響,并進一步探討抗癌活性肽是否通過線粒體途徑影響結腸癌細胞凋亡。
　　 方法：將不同濃度的ACBP作用于體外培養(yǎng)的人結腸癌HT-29細胞,采用MTT比色法檢測不同濃度的抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)對人結腸癌HT-29細胞生長增殖的抑制作用；利用細胞HE染色檢測細胞凋亡的形態(tài)學變化；使用流式細胞儀檢測抗癌活性肽(ACBP)對人結腸癌HT-29細胞的凋亡；

2、應用RT-PCR檢測凋亡相關因子Bcl-2、Bax的表達。
　　 結果:①MTT結果表明不同濃度(10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml、25μg/ml)抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)對人結腸癌HT-29細胞生長增殖具有抑制作用,并呈劑量和時間依賴性。抗癌活性肽(ACBP-NL)作用24h、48h、72h,半數有效抑制濃度(IC50)值分別為:30.3μg/ml,25.9μg/ml,21.2μg/ml；抗癌活

3、性肽(ACBP-L)作用24h、48h、72h,IC50值分別為:24.6μg/ml,22.5μg/ml,17.6μg/ml。②細胞HE染色顯示:使用72h的IC50濃度抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)處理細胞72h后,細胞形態(tài)出現明顯的凋亡特征,如染色質濃縮、凋亡小體等。③流式細胞儀檢測發(fā)現,采用72h的IC50濃度抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)經過72h處理后,細胞發(fā)生的凋亡率較陰性對照組升高。④使用72h的I

4、C50濃度抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)處理細胞72h后,經RT-PCR檢測發(fā)現,凋亡相關因子Bcl-2表達下降、Bax表達增加。
　　 結論：①抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)對人結腸癌HT-29細胞有顯著的生長增殖抑制作用,并具有劑量和時間依賴性；②抗癌活性肽(ACBP-L和ACBP-NL)具有誘導人結腸癌HT-29細胞發(fā)生凋亡的作用,其機制與促進Bax的活化、下調Bcl-2的表達,激活細胞凋亡的線粒體