1、目的:建立適合該實驗室條件的分離純化O-2A譜系細(xì)胞的方法,探討O-2A祖細(xì)胞的體外分化規(guī)律,并從蛋白質(zhì)水平揭示細(xì)胞骨架蛋白vimentin(波形蛋白)和鈣結(jié)合蛋白S-100Βd T1A和T2A分化過程中的表達(dá)差異,為雙譜系細(xì)胞的后續(xù)研究奠定基礎(chǔ).方法:根據(jù)T1A、O-2A祖細(xì)胞的生長時間差異及細(xì)胞的粘附特性不同,采用振蕩法和差速貼壁法,并結(jié)合使用生長因子(PDGF,bFGF),分離純化O-2A祖細(xì)胞,用MTT法檢測其細(xì)胞活性;觀察O-

2、2A祖細(xì)胞在有血清和無血清培養(yǎng)條件下的分化情況;用免疫細(xì)胞化學(xué)方法,觀察vimentin和S-100β在T1A、T2A的表達(dá)情況.結(jié)論:(1)采用振蕩法和差速貼壁法,并結(jié)合使用生長因子,建立了分離純化O-2A譜系細(xì)胞的方法;(2)分離純化的O-2A祖細(xì)胞具有雙潛能性,在體外不同培養(yǎng)條件下,可以定向分化為成熟T2A和OL;(3)T1A和T2A形態(tài)不同,具有分化抗原表達(dá)差異;(4)在星形膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育過程中,vimentin和S-100β的