1、目的：
　　觀察ROCK抑制劑法舒地爾對血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)誘導小鼠足細胞骨架重構的影響，并進一步探討法舒地爾在血管緊張素Ⅱ誘導足細胞骨架重構病變中的保護機制。
　　方法：
　　免疫細胞化學染色鑒定SV40T轉染的條件永生型小鼠足細胞株。將不同濃度(10-9-10-6 mol/L)AngⅡ處理足細胞24h、10-7mol/L AngⅡ以不同時間(6-36h)作用足細胞，觀察足細胞Synap

2、topodin表達的變化。本實驗體外采用10-7mol/L AngⅡ作用足細胞24h致骨架重構的損傷模型。實驗分為3組：對照組、AngⅡ刺激組、法舒地爾干預組。對照組：用RPMI1640培養(yǎng)液培養(yǎng)足細胞；AngⅡ刺激組：采用10-7mol/L AngⅡ干預足細胞24h；法舒地爾干預組：10-6mol/L mol/L法舒地爾預孵育不同時間和不同濃度(10-8-10-6 mol/L)法舒地爾預孵育30 min后，再加入含10-7 mol/L

3、 AngⅡ的培養(yǎng)基，繼續(xù)孵育24h。FITC-鬼筆環(huán)肽熒光染色分析足細胞骨架相關蛋白F-actin結構分布變化；Western Blot檢測足細胞骨架相關蛋白Synaptopodin表達變化。進一步觀察細胞內(nèi)調(diào)節(jié)骨架裝配的Rho/ROCK信號通路的活性，即采用Western Blot檢測Rho激酶I(ROCKI)及磷酸化肌球蛋白磷酸酯酶靶點亞單位1(MYPT1)表達，代表ROCK的表達及活性。
　　結果：
　　AngⅡ以劑量

4、依賴和時間依賴方式下調(diào)足細胞骨架相關蛋白Synaptopodin的表達。AngⅡ使足細胞骨架相關蛋白F-actin結構發(fā)生改變，F(xiàn)-actin由交聯(lián)高度有序地平行聚集成束貫穿于細胞全長，沿細胞呈極性分布解體以松散的網(wǎng)狀結構互相結合，足細胞失去原有的細胞張力。而法舒地爾預處理可減輕AngⅡ介導的Synaptopodin的表達下調(diào)(P<0.05)，法舒地爾預處理可減輕F-actin的重構。法舒地爾預處理可下調(diào) AngⅡ誘導的足細胞Rho激酶