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文檔簡介
1、目的:大蒜(Allium Sativum L.)具有殺菌、降血脂、抗血栓、預防中風和高血壓、保護肝臟和提高機體免疫力、抗癌等功能,是近代醫(yī)藥研究的熱點之一。目前公認大蒜的功效成分是蒜氨酸(Alliin, S-allyl-L-cysteine,2-烯丙基半胱氨酸亞砜)及經(jīng)蒜酶(Alliinase,EC 4.4.1.4)催化裂解產(chǎn)生的大蒜辣素(Allicin,allyl-2-propenethiosulfinate,2-烯丙基硫代亞磺酸酯)
2、及阿霍烯(ajoene)等含硫化合物。蒜氨酸酶又稱蒜酶或蒜氨酸裂解酶。本課題組利用現(xiàn)代生物制藥技術從大蒜中分別提取相對穩(wěn)定的蒜氨酸和蒜酶“高效大蒜新制劑”。蒜酶作為大蒜中主要的原始活性成分之一,分離和純化蒜酶是重要的工作程序。本課題在前人研究工作的基礎上進一步探索蒜氨酸酶的純化方法。分析中試生產(chǎn)過程中蒜酶活力的變化,選擇并確定合理的生產(chǎn)工藝。
方法:本實驗采用Superdex 200 prepgrade、ConA-Seph
3、arose等高校凝膠柱與親和層析,透析,低溫冷凍干燥等技術而得到了純度與活力較高的蒜酶,以丙酮酸法與HPLC法測定蒜酶活力,用Bradford法測定蒜酶蛋白質含量,聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)法測定蒜酶純度。
結果:本課題采用了幾種純化方法以得出了最適合做蒜酶純化的方法,最終從50%的蒜酶原料藥中得到了純度為80%的純蒜酶與活力為1600U/g(HPLC法)的高活力蒜酶,并且通過中試生產(chǎn)檢測而對生產(chǎn)工藝的改善提供了依
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