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1、目的:研究苦參堿對(duì)淋巴瘤Raji細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用,并探討其可能的作用機(jī)制。 方法:不同濃度苦參堿作用于Raji細(xì)胞,MTT比色法測(cè)定細(xì)胞增殖抑制率,采用光鏡,Hoechst33342熒光染色及電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期變化;免疫細(xì)胞化學(xué)染色法觀察survivin蛋白表達(dá)的改變。 結(jié)果:一定濃度苦參堿作用:Raji細(xì)胞后,細(xì)胞生長(zhǎng)受到明顯抑制,且抑制率呈濃度和時(shí)間依賴性;光鏡下可見(jiàn)細(xì)胞由成團(tuán)
2、生長(zhǎng)變?yōu)閱蝹€(gè)散在,細(xì)胞數(shù)明顯減少,細(xì)胞體積變小,變形;熒光顯微鏡下可見(jiàn)核濃縮,聚集,碎裂等典型的凋亡特征;電鏡下可見(jiàn)到凋亡小體形成;流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)隨著苦參堿作用濃度增加,細(xì)胞凋亡率隨之增加,且G0/G1期和G2/M期細(xì)胞比例逐漸增加,其雙期阻滯作用呈濃度依賴性;免疫細(xì)胞化學(xué)染色法顯示隨著苦參堿作用濃度增加,survivin蛋白表達(dá)降低。 結(jié)論: 1、苦參堿在一定濃度范圍內(nèi)可以明顯抑制惡性淋巴瘤Raji細(xì)胞增殖,并呈濃
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