1、研究背景與目的：
　　 惡性腫瘤生長迅速，發(fā)病率及死亡率都相當高，已經(jīng)成為威脅人類健康的重大難題。腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移和復發(fā)都離不開血管的生成。盡管腫瘤組織不存在有序的結(jié)構(gòu)，但從血管新生的觀點來說，新生血管在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的作用和器官發(fā)生發(fā)育同樣重要。內(nèi)皮祖細胞(endothelial progenitor cells，EPCs)是血管內(nèi)皮細胞的前體，具有向血管內(nèi)皮細胞分化的潛能。在正常狀態(tài)下，外周血中的EPCs含量很少，而腫瘤

2、組織則可以釋放各種細胞因子，促使骨髓中的EPCs 動員到外周血循環(huán)中，并逐步募集到血管新生活躍部位，參與該部位的血管發(fā)生和血管生成。
　　 EPCs的這種特性給我們治療腫瘤帶來了新契機：直接抑制內(nèi)皮祖細胞的增殖分化或?qū)⑵渥鳛檩d體攜帶腫瘤抑制基因，并特異性地導入腫瘤生長部位，都有可能成為抗腫瘤治療的新策略。
　　 本實驗研究采用貼壁法分離和培養(yǎng)大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細胞，并以多聚賴氨酸（Poly-L-Lysine,PLL）作為

3、轉(zhuǎn)染劑，在體外利用超微超順磁性氧化鐵顆粒（ultrasmall superparamagnetic iorn oxide ,USPIO）標記內(nèi)皮祖細胞，研究磁性標記對細胞生物學特性的影響；在體外對標記細胞進行磁共振成像，尋找標記細胞體外掃描的最佳序列，為將來觀察移植細胞的遷移及歸巢提供依據(jù)。
　　 材料和方法：
　　 SD 雄性大鼠100g 左右，取雙側(cè)股骨和脛骨，收集骨髓液。利用淋巴細胞分離液分離出單核細胞，采用貼壁生

4、長法分離純化內(nèi)皮祖細胞。以PLL 作為轉(zhuǎn)染劑用USPIO對EPCs 進行磁性標記，標記濃度為25ug/ml。計算標記后1、3、5天細胞標記陽性率、標記細胞活力，采用四氮噻唑藍(MTT)比色試驗評價USPIO-PLL 標記EPCs 后對細胞增殖能力的影響。對不同濃度細胞懸液進行T2map、T2*map 序列掃描，測量不同濃度細胞的弛豫時間及弛豫率，研究細胞濃度和弛豫率之間的關(guān)系，并進行統(tǒng)計學分析。
　　 結(jié)果：
　　 對采

5、用密度梯度離心法獲取的大鼠骨髓單核細胞在體外進行EGM-2 誘導培養(yǎng)，可分化為內(nèi)皮祖細胞。利用USPIO-PLL 作為細胞內(nèi)造影劑可以高效標記內(nèi)皮祖細胞。普魯士藍染色顯示鐵顆粒位于胞質(zhì)內(nèi)，其72 小時細胞標記率達98 ％。臺盼藍染色及MTT 比色法實驗結(jié)果顯示，磁性標記對細胞生物學特性無明顯影響。
　　 同時，磁共振體外T2map 及T2*map 掃描顯示細胞弛豫率隨細胞濃度的減少而減少，呈線性相關(guān)，其R2*效應直線斜率為R2