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文檔簡介
1、目的:探討全反式維甲酸(all-trans-retinoic-acid;ATRA)體外對人肝癌細胞系SMMC-7721細胞體外生長增殖的抑制作用,以及在此過程中Survivin基因表達的變化。 方法:以不同濃度的ATRA處理SMMC-7721細胞,用甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)研究細胞增殖抑制情況;倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)學的變化;流式細胞儀(FCM)Annexin V/PI雙染色法檢測細胞凋亡率的變化;FCM單染色法檢測細胞周
2、期的變化;免疫細胞化學法及RT-PCR琺檢測Survivin蛋白和基因表達水平的變化。 結果=①全反式維甲酸(ATRA)對人肝癌SMMC-7721細胞增殖有抑制作用,這種抑制作用呈時間和劑量依賴性,隨著藥物濃度的逐漸增加和作用時間的逐漸延長,抑制作用呈遞增趨勢;②ATRA能夠誘導人肝癌細胞SMMC-7721的凋亡,隨藥物作用時間的延長、藥物濃度的增高,細胞凋亡率逐漸增高;⑧細胞周期發(fā)生明顯變化,G1/GO期細胞比例逐漸增多,S期
3、逐漸減少,細胞被阻滯在G1/GO期,但對G2/M期細胞的影響則較小。ATRA能夠阻止細胞由G1/GO期向S期轉化,分裂活躍的S期減少,相對靜止的G1/GO期細胞增多,細胞分裂的周期延長,細胞分裂減少,細胞增殖受到抑制;④在細胞凋亡增加和逐漸被分化的同時,Survivin表達逐漸下調。 結論:①全反式維甲酸對人肝癌細胞株SMMC-7721具有明顯的增殖抑制作用,并呈現(xiàn)一定的時間、劑量依賴性;②全反式維甲酸可以誘導人肝癌細胞株SMM
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