1、本文為了進一步提高白藜蘆醇的穩(wěn)定性、增強活性，對白藜蘆醇(resveratrol，Res)結構進行了煙酸酯化修飾，前期的藥理實驗表明白藜蘆醇煙酸酯(resveratroltrinicotinate，ResT)較白黎蘆醇具有更強的中樞作用。采用腫瘤細胞體外藥敏實驗和腫瘤動物模型體內抑瘤實驗，全面觀察白藜蘆醇結構修飾物-白藜蘆醇煙酸酯的抗腫瘤作用，同時以人肝癌細胞(HepG2)為靶細胞對其抗腫瘤作用機制進行初步的探討，為白藜蘆醇煙酸酯用于腫

2、瘤的防治提供理論基礎。 1、白藜蘆醇及其煙酸酯體內抗腫瘤作用的比較。采用荷瘤小鼠模型(肝癌H22和肉瘤S180)分別檢測ResT、Res的抗腫瘤作用。光鏡觀察腫瘤組織病理改變；通過測定脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、血細胞計數(shù)等指標觀察ResT、Res對機體免疫功能的影響。結果表明：ResT、Res25，50，100mg/kg連續(xù)灌胃給藥14d后對小鼠肉瘤S180的平均抑瘤率依次為38.1％，49.4％，62.2％及30.6％，41.4％，

3、54.8％，與對照組比有統(tǒng)計學差異；對人肝癌(H22)的平均抑瘤率依次為35.9％，45.5％，56.6％及30.1％，38.3％，50.2％，與對照組比有統(tǒng)計學差異。其中，ResT在50和100mg/kg劑量下對S180和H22的抑瘤率與相同劑量組Res比較，有統(tǒng)計學差異。同時兩化合物對免疫功能均無顯著影響。光鏡觀察結果顯示ResT、Res可引起腫瘤組織不同程度上的壞死。 2、白藜蘆醇及其煙酸酯體外抗腫瘤作用比較實驗。采用噻唑

4、藍還原法(MTT法)分別檢測ResT、Res對體外培養(yǎng)的人宮頸癌細胞(Hela)、人肝癌細胞(HepG2)及人肺癌細胞(A549)的生長抑制作用，同時光鏡觀察ResT對HepG2細胞形態(tài)學的影響。結果表明：ResT對Hela、HepG2、A549的IC50依次分別為120、90、143μmol/L；Res對三種細胞的IC50依次分別為63、54、78μmol/L。倒置顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)ResT作用于HepG2細胞后，細胞核/漿比減小，細胞

5、核出現(xiàn)固縮、分化現(xiàn)象，提示有可能發(fā)生凋亡。 3、白藜蘆煙酸酯誘導HepG2細胞凋亡的實驗研究。應用Hochest熒光染色法觀察細胞凋亡的發(fā)生；流式細胞術(FCM)檢測分析細胞周期和凋亡率；分別采用免疫組織化學法和免疫印跡(Westrnblot)檢測ResT對HepG2細胞Caspase-3、Bcl-xL、Bax表達的影響。結果表明：ResT作用后，HepG2細胞出現(xiàn)典型的凋亡細胞形態(tài)改變，F(xiàn)CM分析顯示大部分細胞阻滯于G1期，S

6、期細胞比例降低。DNA含量直方圖上出現(xiàn)亞二倍體峰即凋亡峰。免疫組織化學法和免疫印跡結果顯示ResT作用后，HepG2細胞Caspase-3、Bax蛋白的表達增加，而Bcl-xL表達則降低。 綜上所述，本研究表明ResT不僅保留了母體藥物Res的細胞毒活性，且體內抗腫瘤作用優(yōu)于母體藥物本身。誘導腫瘤細胞發(fā)生凋亡是ResT抗腫瘤作用機制之一，其誘導腫瘤細胞發(fā)生凋亡的可能機理為：改變HepG2細胞Bcl-xL/Bax的表達比例，促進細