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1、目的:探討凍融后移植的小鼠卵巢組織對(duì)促性腺激素的反應(yīng)。 方法:將36只性成熟雌性小白鼠用隨機(jī)數(shù)字表法分為卵巢組織新鮮移植組、凍融移植組和對(duì)照組,每組12只。新鮮移植組小鼠切除雙側(cè)卵巢,將卵巢切成小組織塊,每側(cè)卵巢平均切成3塊,每塊的體積約為1mm×2mm×2mm大小,卵巢組織用生理鹽水沖洗干凈后立即移植入小鼠雙側(cè)腎被膜下,每側(cè)腎臟植入3塊;凍融移植組小鼠切除雙側(cè)卵巢,將每側(cè)卵巢平均切成3塊,生理鹽水沖洗干凈后采用玻璃化冷凍方法冷
2、凍保存,2周后將冷凍卵巢組織復(fù)蘇,移植入小鼠雙側(cè)腎被膜下。卵巢組織移植2周后新鮮移植組和凍融移植組,每組用隨機(jī)數(shù)字表法取6只小鼠應(yīng)用7.5IU人絕經(jīng)期促性腺激素及10IU人絨毛膜促性腺激素。通過動(dòng)物術(shù)后陰道脫落細(xì)胞學(xué)檢查、移植卵巢組織光鏡觀察,比較卵泡形態(tài),計(jì)數(shù)各級(jí)卵泡數(shù)目,反映種植后卵巢組織存活、卵泡生長(zhǎng)發(fā)育及對(duì)促性腺激素的反應(yīng)等情況。同時(shí)應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法觀察各組卵泡中卵泡刺激素受體的表達(dá)情況,高倍鏡下新鮮移植組、凍融移植組和
3、對(duì)照組各組分別隨機(jī)取20個(gè)竇狀卵泡和20個(gè)竇前卵泡,顯微攝像頭在相同條件下采集圖像,采用Image-Pro Plus5.0圖像分析軟件進(jìn)行圖像分析,得到積分吸光度值來反映每組卵泡中卵泡刺激素受體的表達(dá)情況。 結(jié)果:新鮮移植組、凍融移植組和對(duì)照組未應(yīng)用促性腺激素小鼠卵巢組織內(nèi)近成熟卵泡百分率分別為2.3%、2.3%和2.6%,應(yīng)用促性腺激素小鼠卵巢組織內(nèi)近成熟卵泡百分率分別為4.2%、4.0%和5.8%,各組內(nèi)分別比較,差異均有統(tǒng)
4、計(jì)學(xué)意義(P<0.05);新鮮移植組和凍融移植組與對(duì)照組比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。新鮮移植組、凍融移植組和對(duì)照組卵泡刺激素受體表達(dá)積分吸光度值在竇狀卵泡中分別為9408±2777、9175±3093和8838±2064,在竇前卵泡中分別為4531±1903、4809±1386和5516±1136,各組間分別比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論:1.卵巢組織冷凍保存、復(fù)蘇及移植過程未影響卵巢卵泡刺激素受
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