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文檔簡介
1、毛囊是皮膚重要而復雜的附屬器官,是一個由上皮細胞和間充質細胞相互作用形成的單位,從內向外依次由毛干、內根鞘和外根鞘組成。除外根鞘外,毛干、內根鞘都是由毛母質(matrix)細胞分化而來的。毛母質是位于毛囊底部的一個增殖區(qū),包繞毛乳頭,毛母質細胞由毛囊干細胞分化而來的,具有高度的增殖潛能和一定的自我更新能力。毛囊發(fā)育和生長受眾多信號通路共同調控,其中Wnt信號通路發(fā)揮關鍵作用。已有研究表明,Wnt信號通路在毛囊的發(fā)育,干細胞的維持和激活,
2、毛干的分化,以及在人和鼠毛母質瘤的形成中都扮演重要角色。WntlOb是Wnt家族中重要成員之一,研究表明Wnt10b在多種生物學作用如脂肪生成、骨生成、腫瘤發(fā)生和體軸的決定等方面都發(fā)揮重要作用。近來研究發(fā)現Wnt10b在觸須和體毛的胚胎發(fā)育過程中表達于毛囊上皮細胞中,可啟動并促進毛囊的發(fā)育。然而至今為止關于Wnt10b在出生后毛囊的表達規(guī)律以及其相關作用的研究報道還比較缺乏,有待我們的探討。 本課題采用了逆轉錄.聚合酶鏈式反應(
3、RT-PCR)和免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)技術檢測了Wnt10b在小鼠毛囊周期中mRNA與蛋白質的表達,擴增并純化了Wnt10b重組腺病毒,應用其表達的Wnt10b蛋白來干預體外培養(yǎng)的觸須毛囊,初步探索了Wnt10b與毛囊周期性生長的關系和可能的作用,主要結果如下: 1、首次發(fā)現Wnt10b在小鼠毛囊中的表達具有規(guī)律性和特異性,在第一周期特異性表達于生長期毛囊的毛母質部位,生長中期表達最強,
4、生長早期和末期表達較弱,在毛囊的其他細胞中沒有表達;退化期和靜止期在整個毛囊都不表達;第二周期生長早期表達于次級毛芽。Ki67在毛母質中的表達變化規(guī)律以及在毛母質中的表達部位與Wnt10b具有一致性。 2、我們對Wnt10b重組腺病毒進行了逐級擴增并應用氯化銫超高速密度梯度離心法純化,病毒最終滴度達到109 PFU/ml; 3、首次發(fā)現加入Wnt10b重組腺病毒可明顯促進體外器官培養(yǎng)的觸須毛囊毛干和內根鞘生長,這與本課題
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