1、目的：通過觀察佐劑性關節(jié)炎大鼠的體重、足趾腫脹度、關節(jié)炎指數(shù)、滑膜病理及對細胞因子(IFN-γ、IL-4)的調(diào)控作用，來評價清熱除痹湯及烏頭合當歸四逆湯兩種寒熱性質不同的中藥湯劑對佐劑性關節(jié)炎大鼠的治療效果，并從以方測證的角度出發(fā)，探討佐劑性大鼠關節(jié)炎模型的寒熱證候偏向，為制作痹病動物證候模型提供參考。 方法：將80只健康雄性Wistar大鼠按體重隨機分為正常組、模型組、清熱除痹湯大、中、小劑量組及烏頭合當歸四逆湯大、中、小劑量

2、組。除正常組外，于其余各組大鼠右后足趾皮下注射加入滅活卡介苗的完全弗氏佐劑(卡介苗濃度為10mg/ml)0.1ml，誘導建立佐劑性關節(jié)炎模型。除正常組及模型組外，其余各組分別給予清熱除痹湯及烏頭合當歸四逆湯大中小劑量灌胃。按照人體(臨床60kg/人)每天正常服藥劑量，日服等效劑量換算受試動物的用藥劑量，大中小劑量分別定為人體常用劑量的15、10、5倍，各治療組共灌胃14天。觀察比較各組大鼠體重增長、足趾腫脹度、關節(jié)炎指數(shù)、關節(jié)滑膜病理學

3、形態(tài)變化及血清細胞因子(IFN-γ、IL-4)水平的變化。 結果：1第10-12天起，模型組大鼠部分出現(xiàn)左后足關節(jié)皮膚發(fā)紅，輕度腫脹。20天左右，大鼠四肢關節(jié)紅腫加重，部分大鼠尾巴上出現(xiàn)明顯結節(jié)、耳部紅斑，大鼠活動量減少，神萎懶動，食欲下降，體重增加緩慢，毛發(fā)失去光澤。24天左右大鼠關節(jié)炎病變最為嚴重，活動困難，體重增長緩慢。正常組大鼠皮毛光澤色白，精神佳、活潑，飲食正常，狀態(tài)良好，毛發(fā)光澤，體重增加明顯，動作自如，反應靈敏。模

4、型組及烏頭合當歸四逆湯大劑量組第28天體重與正常組相比，有極顯著差異(P<0.01)，清熱除痹湯大劑量及烏頭合當歸四逆湯中劑量組第28天體重與正常組相比差異不顯著(P>0.05)。2病理切片HE染色可見：正常組關節(jié)滑膜由滑膜層、纖維層和滑膜皺襞組成，表面有1-2層滑膜細胞，由成纖維細胞樣細胞和巨噬細胞樣細胞組成，滑膜下組織未見水腫，血管無歹云血，無血管翳形成，無纖維組織增生，未見炎性細胞浸潤。模型組關節(jié)滑膜明顯增厚，增生的滑膜組織可呈絨

5、毛狀，滑膜細胞增生、排列紊亂、層次增至3-7層，滑膜細胞數(shù)目增多、體積增大、水腫，滑膜下組織可見大量多形核白細胞、巨噬細胞、淋巴細胞等炎性細胞浸潤，毛細血管及周圍的纖維組織增生，形成血管翳，偶見淋巴濾泡形成。各用藥組關節(jié)滑膜明顯增厚，滑膜細胞增生、排列紊亂、層次增至2-5層，滑膜細胞數(shù)目增多、體積增大、輕度水腫，滑膜下組織可見多形核自細胞、巨噬細胞、淋巴細胞等炎細胞浸潤，偶見毛細血管及周圍的纖維組織增生，無淋巴濾泡和血管翳形成。3實驗第

6、10-12天起，各造模組大鼠相繼出現(xiàn)左后足爪腫脹，各藥物治療組均有不同程度的抑制大鼠左后足腫脹度的作用。實驗第28天，清熱除痹湯大、中劑量組及烏頭合當歸四逆湯大、中劑量組與模型組大鼠左后足腫脹程度相比差異顯著(P<0.05)。4造模組大鼠關節(jié)炎指數(shù)(AI)均逐漸升高，各藥物治療組均有不同程度的抑制模型鼠AI升高的作用。實驗第28天，清熱除痹大、中劑量組與模型組相比差異極顯著(P<0.01)，烏頭合當歸四逆湯大、中劑量組與模型組相比差異顯

7、著(P<0.05)。5清熱除痹湯大劑量治療組IFN-γ水平與空白組相比差異不顯著(P>0.05)，余各治療組IFN-γ水平均與空白組及模型組有顯著性差異(P<0.05)。模型組IL-4水平與空白組相比差異不顯著(P>0.05)，其余各組血清IL-4水平與空白組及模型組相比均有顯著性差異(P<0.05)。 結論：1本實驗研究成功復制了佐劑性關節(jié)炎(AA)模型，模型組大鼠體重增長緩慢，繼發(fā)性關節(jié)紅腫明顯，關節(jié)炎指數(shù)明顯高于空白組，膝

8、關節(jié)滑膜病理顯示，滑膜增生水腫明顯。2各用藥治療組與模型組相比，體重、關節(jié)腫脹度、關節(jié)炎指數(shù)、及滑膜病理均較模型組有所改善，以清熱除痹湯大劑量組及烏頭合當歸四逆湯中劑量治療組療效較為明顯。3清熱除痹湯及烏頭合當歸四逆湯均能升高AA大鼠的IL-4水平，顯著降低AA大鼠血清異常增高的IFN-γ水平，其中清熱除痹湯大劑量治療組降IFN吖能力優(yōu)于其余治療組，提示清熱除痹湯能更有效調(diào)節(jié)促炎／抗炎的細胞因子平衡，改善機體自身免疫異常狀態(tài)，從而減輕從