1、目的 建立應(yīng)用DHPLC技術(shù)檢測PINKl基因突變的技術(shù)平臺，對EOP患者進(jìn)行PINK1基因突變篩查。 方法 應(yīng)用DHPLC技術(shù)對100例EOP患者進(jìn)行PINKl基因突變篩查，對DHPLC篩查發(fā)現(xiàn)異常的PCR擴(kuò)增片段進(jìn)行DNA直接測序和分析。 結(jié)果 對100例EOP患者應(yīng)用DHPLC進(jìn)行PINK1基因突變篩查，共擴(kuò)增900個PCR片段，發(fā)現(xiàn)139個片段表現(xiàn)為DHPLC異常峰型，其中PINK1基因第

2、2、4、5、7、8外顯子均檢測到異常DHPLC峰型；其中63個病例中存在第8外顯子的異常DHPLC峰型，41個病例中存在第5外顯子的異常DHPLC峰型，22個病例中存在第2外顯子的異常DHPLC峰型，7個病例中存在第4外顯子的異常DHPLC峰型，6個病例中存在第7外顯子的異常DHPLC峰型。對DHPLC篩查發(fā)現(xiàn)異常的PCR擴(kuò)增片段進(jìn)一步進(jìn)行DNA直接測序，發(fā)現(xiàn)存在11種堿基改變，其中1種為新發(fā)現(xiàn)的致病突變(C926G)，1種為已知的同義

3、突變(C1362T)，另外9種為單核苷酸多態(tài)(SNP)，分別為IVS2-7a→g、IVS5+68t→a、IVS4+18g→a、IVS4+72g→t、IVS5-5g→a、G1018A、A1562C、3’-UTR37→t，3'-UTR40g→a，其中IVS4+18g→a為新發(fā)現(xiàn)的SNPs。另有5個DHPLC異常峰型經(jīng)DNA直接測序未發(fā)現(xiàn)堿基改變(為假陽性)。 結(jié)論 建立了應(yīng)用DHPLC技術(shù)檢測PINK1基因突變的技術(shù)平臺；在