1、目的：1.觀察PGE2對胃癌MKN28細胞粘附、遷移及侵襲的影響。2.檢測PGE2對胃癌MKN28細胞VEGF表達的影響。3.探討EGFR和ERK2信號轉導通路在PGE2影響胃癌MKN28細胞粘附、遷移、侵襲能力及VEGF表達過程中可能的作用。 方法：1.細胞培養(yǎng)：取人胃腺癌細胞株MKN28按常規(guī)方法培養(yǎng)。2.外源性PGE2處理后，使用MTT法檢測腫瘤細胞粘附能力變化；WoundHealing實驗及Transwell小室結合倒置

2、鏡觀察腫瘤細胞遷移能力變化；Transwell小室結合Matrix膠檢測腫瘤細胞侵襲能力的變化。3.Real-TimePCR實驗結合RT-PCR凝膠成像系統(tǒng)檢測PGE2對腫瘤細胞VEGFmRNA轉錄水平的影響。4.Westernblot實驗檢測PGE2對腫瘤細胞VEGF蛋白表達的影響及對EGFR和ERK2磷酸化水平的影響。5.Westernblot實驗檢測對照組、PGE2處理組及EGFR信號通路特異性抑制劑AG1478、ERK信號通路特

3、異性抑制劑PD98059處理組VEGF蛋白表達水平的變化，同時檢測EGFR、ERK2磷酸化水平的變化。 結果：1.外源性PGE2可明顯增加胃癌MKN28細胞的粘附比率、遷移及侵襲細胞數(shù)量，10μM的PGE2作用3h后，粘附細胞比率較對照組增加64.03﹪(P＜0.01)；遷移細胞及侵襲細胞數(shù)量較對照組增加182.78﹪(P＜0.01)、217.57﹪(P＜0.01)。 2.ERK信號通路特異性抑制劑PD98059及EGF

4、R信號通路特異性抑制劑AG1478均可顯著抑制由PGE2誘導的MKN28細胞粘附、遷移及侵襲。 3.Real-TimePCR實驗結果發(fā)現(xiàn)：對照組MKN28細胞中有微量VEGFmRNA轉錄及蛋白表達，經用0.5μM、1μM、5μM、10μMPGE2處理后，VEGFmRNA轉錄水平及蛋白表達水平均顯著增加且與PGE2濃度之間存在明顯相關性。 4.PGE2刺激后，ERK2磷酸化水平、EGFR磷酸化水平及VEGF蛋白表達水平均有

5、明顯提高。 5.AG1478可明顯抑制PGE2所誘導的EGFR磷酸化、ERK2磷酸化、及VEGF的表達。 6.PD98059可顯著抑制PGE2所誘導的ERK2磷酸化及VEGF的表達，但對EGFR磷酸化水平無明顯影響。 結論：1.PGE2可顯著增加胃癌MKN28細胞的粘附、遷移及侵襲能力，PGE2促進腫瘤細胞粘附、遷移及侵襲可能與激活MAPK/ERK及EGFR信號通路相關。 2.外源性PGE2可顯著增加胃癌