氟化鉀和高氟茶細胞及遺傳毒性的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:氟是人體必需的微量元素,氟既是天然的致地球化學性疾病的病因,又是工業(yè)生產和生活燃煤的重要污染物。氟與鈣磷代謝有密切關系,過量攝入氟可累及機體各組織器官,主要表現(xiàn)在對骨骼和牙齒的損害。隨著工業(yè)生產的發(fā)展,人群暴露于氟的機會愈來愈多,有關氟的毒性和茶葉的安全性問題引起了人們的關注,尤其是潛在的遺傳毒性的研究已經開始受到重視。我們選擇氟化鉀和對環(huán)境中氟有較強富集作用的茶葉作為研究對象,旨在了解氟化鉀和高氟茶的細胞毒性、致突變性和DNA損

2、傷,試圖探討氟的遺傳毒性,并為茶葉的安全飲用提供實驗依據(jù)。 方法:用氟離子選擇電極法測定綠茶A、綠茶B和對照茶浸提液中氟化物的含量。通過臺盼藍拒染法和MTT比色法檢測氟化鉀和不同濃度的茶葉浸提液對V79細胞作用不同時間后細胞存活率的變化,了解濃度-時間-毒性效應關系;采用鼠傷寒沙門菌/回復突變試驗(Ames試驗),探討氟化鉀和2種高氟茶的致突變性;采用單細胞凝膠電泳技術研究氟化鉀和高氟茶浸提液對V79細胞的DNA損傷程度及類型,

3、比較含不同氟含量的茶湯對DNA損傷程度的差別。 結果:綠茶A、綠茶B和對照茶浸提液中氟化物的濃度分別為2330mg/kg、1390mg/kg、7.53mg/kg。綠茶A、綠茶B的氟含量超過了農業(yè)行業(yè)標準;在臺盼藍拒染法和MTT比色法都檢測到:氟化鉀、綠茶A和綠茶B茶湯對V79細胞活性有抑制作用,并具有明顯的時間-效應和劑量-效應關系;在臺盼藍拒染法試驗中,從4h和24h的半數(shù)抑制濃度知,氟化鉀的IC50明顯低于三種茶葉,且對照茶

4、>綠茶B>綠茶A,在4h(2.50~10.00mg/mL劑量范圍)和24h作用后,氟化鉀、綠茶A和綠茶B的細胞存活率明顯低于對照茶(p<0.05),且綠茶A的毒性大于綠茶B(p<0.05)。在MTT試驗中,氟化鉀和綠茶A、綠茶B的細胞存活率明顯低于對照茶(p<0.05),且在作用4~24h時,綠茶A的細胞存活率低于綠茶B(p<0.05),氟化鉀和3種茶的各時點的IC50分析發(fā)現(xiàn),平均IC50分別為28.18mg/mL(對照茶)>23.2

5、4mg/mL(綠茶B)>20.26mg/mL(綠茶A)>0.93 mg/mL(氟化鉀);Ames實驗發(fā)現(xiàn)氟化鉀和高氟茶綠茶A和綠茶B均無致突變性,但氟化鉀在5000ug/皿劑量上對TA98、TA100、TA102三菌株有明顯的抑制作用:在單細胞凝膠電泳技術中,氟化鉀、綠茶A和綠茶B浸提液可引起V79細胞的DNA損傷,且隨著濃度的增加而加重。氟化鉀的DNA損傷作用(p<0.05)>綠茶A(p<0.05)>綠茶B(p<0.05)。而對照茶在

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