1、愈傷組織以其繁殖速度快、易于保存等優(yōu)點被認為是果樹種質資源離體保存的一種方式，然而愈傷組織在組織培養(yǎng)中會存在許多遺傳變異。轉座子的轉座激活也被證實是導致遺傳變異的分子機制之一，近幾年的研究發(fā)現(xiàn)轉座子還參與到了基因組進化、基因表達調(diào)控、逆境響應等過程。研究果樹轉座子激活有助于為降低種質保存的遺傳變異提供分子基礎，有助于為創(chuàng)新種質資源提供新方法，有助于為理解果樹芽變提供新思路。本課題檢測了長期保存后的柑橘愈傷的體細胞胚胎發(fā)生能力，利用Tra

2、nsposon Display(TD)、Southern雜交、定量PCR等方法檢測了長期保存的柑橘愈傷中轉座子的轉座活性，同時探索了誘導轉座子轉座激活的因素，主要實驗結果如下:
　　1.長期繼代保存的伏令夏橙愈傷組織依然保留著體細胞胚胎發(fā)生能力，本研究所用的9個長期繼代的該品種愈傷系材料中6個具有胚胎發(fā)生能力，經(jīng)流失細胞儀鑒定，胚狀體能保持原來的倍性。然而，6個愈傷系材料的胚狀體中僅有1個愈傷系能夠生芽。因此長期繼代保存會對柑橘愈

3、傷的體細胞胚胎發(fā)生能力產(chǎn)生影響。
　　2.TD實驗結果表明:在長期保存柑橘愈傷中，Csgypsy1、Csgypsy2、Cscopia3、CsMuDR1、CsMITE1、Cs Tcs1、Cscopia1、CshAT1有單套染色體轉座子拷貝數(shù)的變化。其中Cs gypsy1和Csgypsy2在愈傷中其單套染色體轉座子拷貝數(shù)隨著愈傷倍性增加而增加，這一結論也在Cscopia3的Southern雜交結果中得到證實。同時，通過DNA甲基化敏感

4、內(nèi)切酶的Southern雜交實驗結果也說明了轉座子區(qū)域確實存在一定程度的DNA甲基化。
　　3.定量PCR實驗結果表明，Csgypsy2、Cscopia3、CsMuDR1、CsMITE1的轉錄水平都比較低，而Csgypsy1卻有較高的轉錄水平，說明不同轉座子類型轉錄活性差別較大。低溫逆境會導致轉座子CsGypsy1、Cscopia3在部分柑橘愈傷系中的轉錄水平升高，TD實驗也證明Cscopia3的拷貝數(shù)隨著冷處理的時間延長而增加。