小麥光敏色素基因家族的克隆、表達分析與功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、光是植物生長的重要環(huán)境因素,對植物的營養(yǎng)生長、生殖發(fā)育都有重要的影響,其通過一系列的信號途徑最終導致相應生化現(xiàn)象,諸如氣孔開閉、光呼吸、葉綠體運動、光合作用、光形態(tài)建成、植物生物鐘等現(xiàn)象。光敏色素是植物體內一類重要的光受體,它們感知光質、強度、方向和周期性的變化,進而對植物生長和發(fā)育產生非常重要的影響。擬南芥光敏色素介導的光信號通路的研究已經相當透徹,但作物中有關光敏色素的研究相對較少。擬南芥光敏色素A(AtphyA)是遠紅光的主要受體

2、,參與抑制下胚軸的伸長、促進子葉的開張和花青素積累,阻斷持續(xù)遠紅光條件下的變綠。本試驗通過RT-PCR技術克隆得到小麥的3個光敏色素A基因(TaPHYAs:TaPHYA1、TaPHYA2、TaPHYA3),對其基因結構和預測的蛋白質結構進行了分析;利用Real-time PCR技術對TaPHYA1、TaPHYA2和TaPHYA3在各種光質、黑暗到不同光質轉換、長日照、短日照處理以及組織器官的特異表達模式進行了分析;通過轉基因互補擬南芥p

3、hyA-211突變體,對它們的功能進行了初步研究。研究結果與結論如下:
  1.普通小麥在染色體4AL、4BS和4DS上各攜帶1個PHYA基因,采用RT-PCR的方法對其進行了克隆,并將這3個基因分別命名為TaPHYA1、TaPHYA2和TaPHYA3。
  2.小麥PHYA基因具有非常相似的結構,TaPHYA1和TaPHYA3的外顯子(exon)和內含子(intron)位置和大小一致,TaPHYA2由于單核苷酸突變導致基因

4、提前終止,但其第一個exon和第一個intron位置和其它兩個PHYA基因也很一致。
  3.TaphyAs蛋白均具有光敏色素的特征結構域,包括發(fā)色團結合區(qū)GAF(cGMP-stimulated phosphodiesterase)、PAS、組氨酸激酶相關區(qū)域HisKA(histidine kinase–related domain)等。3個小麥光敏色素A蛋白的結構域分布較一致,TaphyA2由于提前終止導致蛋白質結構域缺失His

5、KA domain和HATPase_c domain。
  4.在不同光質、黑暗到不同光轉換、長日照、短日照條件下TaPHYA1和TaPHYA2的轉錄表達模式更為相似,而異于TaPHYA3的表達,TaPHYA3的表達量明顯高于TaPHYA1和TaPHYA2。
  5.小麥幼穗中TaPHYAs的表達量明顯高于根、莖、葉和鞘,且與TaPHYA1和TaPHYA2相比,TaPHYA3的表達量在幼穗中明顯較低,但在根、莖、葉、鞘中較高

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