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文檔簡介
1、本論文分為三部分:第一部分文獻綜述對用作海桐皮的不同植物來源的品種、化學成分、藥理活性研究現(xiàn)狀進行了綜述。 第二部分海桐皮有效部位的實驗研究1.對四川產海桐皮進行了對照品研究。經過反復硅膠柱層析和制備HPLC法分離得到一個皂苷類化合物單體49.5mg,利用波譜技術(包括UV,IR,MS,1H-NMR,13C-NMR)鑒定其結構為:常春藤皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖-(1→2)-α-L-阿拉伯吡喃糖苷,經HPLC法測定純度為
2、99.2%。 2.建立了海桐皮有效部位的制備方法。首先優(yōu)化了海桐皮有效部位的提取工藝,以總皂苷含量為指標對提取工藝進行優(yōu)化,經正交實驗考察,確定最佳提取工藝為:確定最佳提取工藝為Q1%乙醇、用量為8倍量、提取2小時。繼而對大孔樹脂分離富集有效部位的工藝進行了篩選及優(yōu)化。以總皂苷含量為指標,對樹脂類型進行篩選,結果A樹脂對有效部位中總皂苷吸附量大,解吸容易,有效部位的總皂苷含量高。通過對上樣量與樹脂體積的比、洗脫劑、層析柱徑高比、
3、上樣液濃度、上樣流速、洗脫流速、洗脫體積及使用壽命等參數的考察,確定最佳凈化工藝為:樹脂體積和上樣體積的最佳比例為1:3.5,上樣液濃度為20mg/ml,洗脫劑為Q3%乙醇,層析柱的D/L為1:5,吸附流速為1ml/min,洗脫流速為3ml/min,層析樹脂至少可以重復使用8次。在優(yōu)化的提取純化工藝條件下制備了10批有效部位。 3.建立了有效部位的HPLC指紋圖譜檢測方法。精密度實驗考察結果表明:各共有峰相對保留時間的RSD在0
4、.5-2.41%之間,峰面積比值的RSD6.28-7.78%;穩(wěn)定性實驗結果表明:供試品溶液在8h內穩(wěn)定;重復性實驗結果表明:各共有峰相對保留時間的RSD在0.15-1.07%,峰面積比值的RSD在4.02-5.01%。 4.建立了海桐皮提取物和有效部位中總皂苷的含量測定方法。采用香草醛—高氯酸比色法對海桐皮有效部位的總皂苷含量測定進行了方法學考察,并對藥材提取物和10批有效部位進行了含量測定。以常春藤配基-3-O-α-L-鼠李
5、吡喃糖-(1→2)-α-L-阿拉伯吡喃糖苷為對照品,實驗結果表明取樣量在0.1~0.4mg之間時線性關系良好,回歸方程為:y=2.0025x+0.0269,r=0.9991;加樣回收率為95.06%,RSD為2.15%。精密度、重復性、穩(wěn)定性實驗結果也均符合要求。測定有效部位總皂苷平均含量為66.25%,RSD為2.16%,藥材提取物中總皂苷的平均含量為45.24%,RSD為1.00%。 5.建立了海桐皮有效部位中常春藤配基-3
6、-O-α-L-鼠李吡喃糖-(1→2)-α-L-阿拉伯吡喃糖苷(皂苷A)的HPLC含量測定方法,并對藥材提取物和10批有效部位進行了含量測定。實驗結果表明進樣量在0.5~2.5μg之間時線性關系良好,其回歸方程為:y=462.07x,r=0.9999,加樣回收率為99.59%,RSD為2.30%。精密度、重復性、穩(wěn)定性實驗結果均符合要求。藥材提取物中皂苷A的含量為4.713mg/g。有效部位中皂苷A的平均含量為0.76%,RSD為2.03
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