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文檔簡(jiǎn)介
1、背景和目的:骨髓增生異常綜合征(myelodysplastic syndome,MDS)是一組異質(zhì)性惡性克隆性造血干/祖細(xì)胞疾病。目前MDS診斷主要依賴于綜合患者臨床癥狀、血象、外周血及骨髓涂片和骨髓活檢形態(tài)學(xué)以及細(xì)胞遺傳學(xué)等的結(jié)果,然而MDS臨床表現(xiàn)可以多種多樣,形態(tài)學(xué)變化受主觀因素干擾大,而且只有約40%~50%患者檢出細(xì)胞遺傳學(xué)異常,因此有時(shí)難以確定MDS診斷。近年來,流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,F(xiàn)CM)已經(jīng)廣泛應(yīng)用
2、于血液系統(tǒng)腫瘤(如白血病和淋巴瘤)的免疫表型檢測(cè),為診斷、分型、治療和預(yù)后提供客觀的輔助依據(jù)。MDS作為血液系統(tǒng)腫瘤的一種,本研究利用多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)了解MDS患者骨髓細(xì)胞免疫表型特征,并通過初步構(gòu)建流式積分系統(tǒng),探討其在診斷、鑒別診斷及預(yù)后中的臨床意義。
方法:收集41例MDS患者和30例非MDS患者骨髓標(biāo)本,應(yīng)用多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù),采取一系列的抗體組合和CD45/SSC設(shè)門策略,對(duì)骨髓細(xì)胞表面抗原表達(dá)及原始細(xì)胞數(shù)進(jìn)行檢測(cè)
3、,采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)和單方向方差分析比較MDS與non-MDS及MDS亞型間原始細(xì)胞數(shù)、各抗原表達(dá)情況及流式積分,分析其免疫表型特點(diǎn),并據(jù)此構(gòu)建流式積分系統(tǒng),同時(shí)結(jié)合血液學(xué)、形態(tài)學(xué)及細(xì)胞遺傳學(xué)等檢查結(jié)果,采用ROC曲線分析和Spearman相關(guān)分析評(píng)價(jià)該積分系統(tǒng)的優(yōu)缺點(diǎn)。用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
結(jié)果:MDS與non-MDS相比,原始細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及有核紅細(xì)胞群比例均顯著升高(p值分別為:
4、0.000、0.000、0.001及0.029),而成熟粒細(xì)胞群比例顯著下降(P=0.021);原始細(xì)胞群比例在RCMD、RAEB-I和RAEB-II亞型間逐漸增高,在RCMD與RAEB-I、RCMD與RAEB-II及RAEB-I與RAEB-II亞型間有顯著差異(p值分別為:0.020、0.000及0.010),余細(xì)胞群比例亞型間無顯著差異(p值均>0.05)。CD34、CD123和CD133在原始細(xì)胞群表達(dá)顯著增高(p值分別為:0.0
5、00、0.003和0.000),CD38、HLA-DR、CD13、CD33、CD7和CD117表達(dá)均無顯著差異(p值分別為:0.223、0.306、0.536、0.273、0.577和0.368);CD34在RCMD、RAEB-I和RAEB-II亞型間表達(dá)逐漸升高,在RCMD與RAEB-I、RCMD與RAEB-II及RAEB-I與RAEB-II亞型間表達(dá)有顯著差異(p值分別為:0.022、0.000和0.000),CD133、CD117
6、、CD13和HLA-DR在RAEB-II表達(dá)比RCMD顯著增高(p值分別為0.001、0.000、0.001和0.047);其余抗原亞型間比較均無顯著差異(P>0.05)。CD10、CD11b、CD15、CD16和CD66d在成熟粒細(xì)胞群表達(dá)顯著增高(p值分別為:0.012、0.027、0.016、0.005和0.024);CD33、CD13、HLA-DR、CD56及CD117表達(dá)均無顯著差異(p值分別為0.058、0.337、0.64
7、9、0.096和0.081);CD10在RAEB-II型表達(dá)顯著低于RAEB-I型(P=0.001);CD13和HLA-DR在RCMD型表達(dá)顯著低于RAEB-I和RAEB-II型(p分別為0.013、0.005和0.018、0.003);其余抗原亞型間比較均無顯著差異(P>0.05)。
CD15、CD33和CD64 在單核細(xì)胞群表達(dá)均顯著升高(p值分別為:0.001、0.007和0.000);CD7、HLA-DR、CD14
8、、CD13、CD61和CD56表達(dá)均無顯著差異(p值分別為:0.075、0.066、0.408、0.153、0.137和0.322);所有抗原亞型間比較均無顯著差異(P>0.05)。
在淋巴細(xì)胞群CD25+CD8+、CD7和CD8表達(dá)顯著升高(p值分別為:0.000、0.002和0.004),CD5和CD19表達(dá)顯著降低(p值分別為0.011和0.000);CD25+CD4+、CD4、CD25和CD56表達(dá)均無顯著差異(p
9、值分別為:0.524、0.508、0.942和0.978);CD5在RCMD和RAEB-II的表達(dá)均顯著高于RAEB-I(p值分別為:0.006和0.037)。其余抗原亞型間比較均無顯著差異(P>0.05)。
GPA+CD71+、CD71、CD105和GPA在有核紅細(xì)胞群表達(dá)均顯著升高(p值分別為:0.026、0.020、0.033和0.024),GPA+CD105+和CD71+CD105+表達(dá)均無顯著差異(P值分別為:0
10、.050和0.938)。所有抗原亞型間比較均無顯著差異(P>0.05)。
在41例MDS患者中有7例檢出復(fù)雜核型異常,且均為RAEB-II患者,占MDS患者的17%,占RAEB-II患者的47%;核型異常與IPSS積分呈顯著正相關(guān)(r=0.703,P=0.000)。
通過骨髓原始細(xì)胞數(shù)和各細(xì)胞群不同抗原表達(dá)情況初步構(gòu)建流式積分系統(tǒng),該積分系統(tǒng)用于MDS診斷有較高符合率(P=0.000),95%可信區(qū)間為(0.
11、921,0.997),靈敏性和特異性分別為:87.8%和86.7%,MDS組比non-MDS組流式積分顯著升高(P=0.000),RCMD、RAEB-I和RAEB-II亞型間,隨著疾病進(jìn)展,流式積分也顯著升高(P=0.000)。
流式積分與MDS分型、染色體核型、IPSS和WPSS呈顯著正相關(guān)(r值分別為:0.656、0.410、0.791和0.425,p值分別為:0.000、0.008、0.000和0.006)。骨髓各細(xì)
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