高碘誘導的自身免疫甲狀腺炎小鼠發(fā)病中調(diào)節(jié)性B細胞的變化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的
   自身免疫甲狀腺炎(Auto immune thyroiditis,AIT)是典型的器官特異性自身免疫性疾病,AIT患者體內(nèi)存在免疫耐受障礙,免疫應答調(diào)節(jié)受損以致免疫應答和炎癥反應過強而造成甲狀腺細胞的自身免疫性損傷,發(fā)病機制與細胞免疫和體液免疫異常均相關。B細胞主要通過呈遞抗原和產(chǎn)生抗體參與體液免疫,其分化為不同亞群參與免疫反應的正向免疫效應與負向免疫調(diào)節(jié)過程。新近研究發(fā)現(xiàn)存在一種新的B細胞亞群——調(diào)節(jié)性B細胞(re

2、gulatory B cell,Breg),其與B細胞在自身免疫病中通常扮演致病性角色不同,Bregs通過分泌白細胞介素-10(IL-10)、轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)等抑制性細胞因子介導免疫耐受,發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[3]。本研究通過高碘誘發(fā)NOD.H-2h4小鼠發(fā)生自身免疫甲狀腺炎,觀察此動物模型脾臟Bregs及相關細胞因子表達量的變化,探討B(tài)regs在AIT發(fā)生、發(fā)展中的免疫調(diào)節(jié)作用。
   方法
   選取4周齡

3、NOD.H-2h4雌性小鼠40只,體重20克左右,隨機分為2個對照組(給予無菌雙蒸水)和2個高碘飲水組(給予含0.005%碘化鈉水,相當于小鼠正常碘攝入量的100倍),每組10只。于實驗開始后第10、20周麻醉分別處死1個對照組和1個高碘飲水組。留取各組NOD.H-2h4小鼠甲狀腺,HE染色觀察淋巴細胞浸潤情況并進行甲狀腺炎癥程度評分;酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定各組小鼠血清甲狀腺球蛋白抗體(TgAb)水平;制備各組NOD.H-2

4、h4小鼠脾臟單個核細胞懸液,免疫熒光染色流式細胞儀分析CD1dhiCD5+CD19+調(diào)節(jié)性B細胞比例的變化;提取小鼠脾細胞總RNA,實時定量RT-PCR檢測調(diào)節(jié)性B細胞相關細胞因子白細胞介素-10(IL-10)和轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)mRNA的表達水平。應用SPSS17.0軟件處理和分析數(shù)據(jù)。
   結(jié)果
   NOD.H-2h4小鼠飲高碘水10周及20周后甲狀腺組織有不同程度的淋巴細胞浸潤,甲狀腺炎的發(fā)生率、甲

5、狀腺炎癥程度組織學評分、血清TgAb水平均明顯高于飲用無菌雙蒸水的對照組(P<0.05);發(fā)生AIT的小鼠脾臟B細胞中CD1dhiCD5+CD19+Bregs所占比例和脾組織及脾細胞中IL-10mRNA、TGF-βmRNA表達量較對照組明顯降低(P<0.05)。隨著高碘飲水時間的延長,甲狀腺炎的發(fā)生率及甲狀腺炎癥程度組織學評分呈升高趨勢,而脾臟Bregs表達則呈降低趨勢。
   結(jié)論
   高碘誘導的發(fā)生AIT的NOD.

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