1、背景:長期飲酒所引起的酒精性肝病(alcoholic liver disease，ALD)已經成為我國人群慢性肝臟疾病的一個重要病因。輔助性T細胞17(helper T cells17，Th17)是新近發(fā)現(xiàn)的一個CD4+T細胞亞群，在多種免疫相關性疾病中激活并通過招募相應免疫細胞和分泌相關細胞因子(主要是IL-17)等方式發(fā)揮作用。本研究旨在通過改良小鼠胃造瘺模型研究Th17及其相關細胞因子在ALD發(fā)生發(fā)展中的作用，并闡述其機制。

2、>　　方法:本研究使用成年（8周齡，體重20-25 g）雄性ICR小鼠建立改良型小鼠胃造瘺模型并隨機分為以下幾組:對照組1(Con)，通過造瘺管生理鹽水灌胃(30ml/kg·天，4周);酒精性肝病組1-3(ALD1-ALD3)，60％酒精灌胃（30 ml/kg·天），時間分別為4、8、12周;酒精性肝病組4(ALD4)，酒精灌胃采用的方式與時間與ALD3組相同，第9周開始每周通過尾靜脈分別注射含有1μg抗IL-17抗體的生理鹽水200μ

3、l。每組6只小鼠。建模完成后稱取肝臟重量，計算肝重/體重比值;并收集各組小鼠血液標本及組織標本，評估各組小鼠肝臟組織學損傷情況，檢測其肝功能、血漿細胞因子濃度、Th17細胞百分比、Th17相關轉錄因子mRNA濃度，進行組織標本二維差異凝膠電泳(two-dimensional difference gelelectrophoresis，2D-DIGE)、質譜(mass spectrometry，MS)確定差異蛋白并進行免疫印跡(weste

4、rn blotting，WB)實驗。
　　結果:肝重/體重比值、肝酶及病理學檢查發(fā)現(xiàn)隨著ALD的進展，小鼠肝臟炎癥、壞死的程度逐漸加深，同時肝臟表現(xiàn)出現(xiàn)進行性纖維化。以抗IL-17處理有效減輕酒精灌胃12周小鼠的肝臟壞死和肝硬化水平，注射抗IL-17抗體對肝功能具有保護作用。與對照組相比，除TNF-α外，酒精性肝病組小鼠各細胞因子在不同時相出現(xiàn)具有統(tǒng)計學差異的升高（除IL-23與IL-6的ALD1組外）;而TNF-α在ALD1上升

5、后不同時相出現(xiàn)下降趨勢，注射抗IL-17引起IL-1b、IL-10、TNF-α水平明顯升高，而IL-6、IL-17A、IL-23水平明顯降低，有統(tǒng)計學意義。慢性酒精灌胃轉錄因子Rorγt出現(xiàn)具有統(tǒng)計學差異的升高，且這種升高呈現(xiàn)時間相關性;慢性酒精灌胃12周(ALD3)后IL-17、IL-21、IL-23等細胞因子轉錄水平明顯升高，有統(tǒng)計學意義;注射含抗IL-17抗體的生理鹽水抑制以上基因表達。Th17細胞百分比隨著ALD的進展呈現(xiàn)上升趨

6、勢，ALD3組各指標顯著高于Con組?？笽L-17抗體Th17細胞百分比下降，表明Th17細胞的分化受到了抑制。2D-DIGE和MS及WB分析表明碳水化合物反應原件結合蛋白(carbohydrate responseelement binding protein，CHREBP)、山羊固醇調節(jié)原件結合蛋白1c(sterolregulatory element-binding protein-1c，SREBP-1c)的隨著ALD的進展呈現(xiàn)上

7、升趨勢，烯酰酯輔酶A水合酶1(enoyl-coenzyme Ahydratase，ECHS1)和過氧化物酶增殖子激活受體α(peroxisome proliferator-activated receptorα，PPARα)的表達隨著ALD的進展呈現(xiàn)下降趨勢，注射抗IL-17抗體抑制CHREBP、SREBP-1c的表達，而促進ECHS1、PPARα表達，表明抗IL-17抗體在肝細胞脂肪代謝過程中發(fā)揮抑制脂肪形成促進脂肪代謝的作用，減輕脂