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1、我們應(yīng)用hTERT啟動(dòng)子,構(gòu)建了hTERT啟動(dòng)子調(diào)控的攜帶HSV-tk基因的重組腺病毒載體,將其導(dǎo)入人膀胱癌細(xì)胞,觀察它在體內(nèi)和體外對(duì)膀胱癌細(xì)胞的殺傷效應(yīng).結(jié)論1本研究成功構(gòu)建了分別由hTERT啟動(dòng)子和CMV啟動(dòng)子調(diào)控的攜帶HSV-tk基因和EGFP基因的重組腺病毒Ad-hTERT-HSV/tk、Ad-CMV-HSV/tk、Ad-hTERT-EGFP和Ad-CMV-EGFP.對(duì)其進(jìn)行純化、擴(kuò)增后具有較高的滴度.2 hTERT啟動(dòng)子控制下
2、的重組腺病毒Ad-hTERT-EGFP能特異性轉(zhuǎn)染膀胱癌253J細(xì)胞,其轉(zhuǎn)染效率隨MOI的增高而增加;在GCV作用下,hTERT啟動(dòng)子控制下HSV-tk基因的表達(dá)能特異地殺傷膀胱癌細(xì)胞253J,而對(duì)正常細(xì)胞MRC-5無(wú)明顯殺傷作用,且具有明顯的旁觀者效應(yīng).3異種動(dòng)物移植253J細(xì)胞后,HSV-tk/GCV系統(tǒng)對(duì)體內(nèi)膀胱腫瘤的生長(zhǎng)有明顯抑制作用.光鏡及電鏡顯示:治療組腫瘤細(xì)胞增殖減低,有片狀壞死,腫瘤血管明顯減少,纖維組織增生,部分細(xì)胞胞
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