1、納米控釋系統(tǒng)作為新型的藥物載體，具有緩釋、靶向、提高生物利用度，減少副作用等特點。將載體材料制成不同粒徑的納米粒子與連接適當配體作為抗腫瘤藥物載體的研究成為近年來國內外一個極為重要的研究熱點。本研究制備了載表阿霉素(EPI)的納米粒，并合成了生物素化的殼聚糖(Bio—CS)，以此來修飾納米粒，增強與腫瘤細胞的相互作用，達到靶向抗腫瘤作用，增強藥物抗腫瘤效果。 ⑴選用W1/O/W2復乳法制備了載EPI的PLGA納米粒，采用兩種方法

2、用CS修飾PLGA納米粒表面：吸附的方法和共價交聯(lián)的方法。粒徑分析未修飾的PLGA納米粒平均粒徑為(248.4±21.0) nm，Zeta電勢為—(21.21±2.13) mV，掃描電鏡(SEM)及透射電鏡(TEM)下觀察其形態(tài)圓整，測定藥物包封率為(84.1±3.4)％。通過X射線光電子能譜(XPS)檢測到CS修飾后的納米粒表面含有氮元素信號；紅外光譜(FT—IR)證實了具有氨基特征峰，證明修飾后的納米粒表面為CS。兩種方式修飾后納米

3、粒表面電勢為正電荷，且粒徑、包封率及釋藥性質發(fā)生了不同程度的改變，修飾后的納米粒藥物包封率下降，但藥物的釋放更加平緩且突釋降低，特別是共價交聯(lián)方法修飾的納米粒具有釋藥平緩的特點。 ⑵通過不同的投料比合成了三種不同取代度的Bio—CS，通過1HNMR以及光電子能譜(ICP)確定了Bio—CS取代度，以此通過共價交聯(lián)的方式修飾PLGA納米粒表面，考察了納米粒的表面電勢、粒徑、載藥量、包封率以及體外釋藥性質等通過XPS以及生物素試劑盒

4、確定修飾后的納米粒表面生物素的量。選擇最優(yōu)取代度的Bio—CS來進行下階段研究。體外抑瘤效應選用Hela細胞，研究了空白納米粒載體的細胞毒效應，載藥納米粒在4、24、48、72h時的抑瘤效應，并考察了Hela細胞在不同時間點對各種納米粒的吞噬能力。研究結果表明納米粒的載體材料在24h、48h的細胞活力均在90％以上，材料無明顯的細胞毒效應；載藥納米粒特別是修飾后的納米粒在48h時表現(xiàn)出強的殺瘤效應，連接了靶向配體生物素的納米粒殺瘤效應更

5、強。熒光顯微鏡觀察細胞吞噬納米粒的能力，并且通過流式細胞術定量檢測細胞的熒光強度，實驗結果表明，隨著時間的延長，細胞吞噬納米粒的量增加，24h時未修飾的納米粒熒光強度最強，48h時Bio—CS修飾的納米粒組細胞內熒光強度最強，通過加入過量的生物素封閉細胞表面的生物素受體，可以觀察到Bio—CS修飾的納米粒進入細胞的能力減弱。 ⑶通過小鼠體內急性及亞急性毒性實驗初步評價了納米粒的安全性，通過靜脈注射給藥，觀察記錄14d內小鼠的狀態(tài)