1、目的： 分析中藥益智健腦顆粒(YiZhiJianNaoKeLi,YZJNKL)干預P8系快速老化小鼠(Senescence Accelerated Mouse P8，SAMP8)顳葉組織的差異蛋白質表達，從蛋白質的角度探討中藥益智健腦顆粒防治阿爾茨海默病(Alzheimers disease，AD)的作用機理。 方法： (1)采用30只6月齡SAMP8隨機分為三組，一組為治療組(n=10)，灌服益智健腦顆粒濃縮液

2、；一組為模型組(n=10)，不予處理即處死；一組為對照組(n=10)，灌服等劑量雙蒸水。 (2)8周后，應用雙向凝膠電泳技術(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分別分離治療組、模型組、對照組SAMP8顳葉組織總蛋白，膠體考染顯色，Image Scan對膠體考染的2-DE膠掃描以獲取電子圖像，PDQuest圖像分析軟件比較分析三組的雙向凝膠電泳圖譜并識別差異表達的蛋白質，應用基質輔助

3、激光解吸電離飛行時間質譜技術(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS)得到相應的肽質量指紋圖譜 (peptide mass fingerprinting，PMF)，搜索數(shù)據(jù)庫對鑒定部分差異表達的蛋白質點進行鑒定。 結果： (1)建立了治療組、模型組和對照組SAMP8顳葉組織的2-DE

4、圖譜。 (2)比較分析三組SAMP8顳葉組織的2-DE圖譜，發(fā)現(xiàn)治療組與模型組存在37個差異蛋白點，其中有12個在治療組表達上調，17個表達下調，5個只在治療組表達，3個只在模型組表達；治療組與對照組之間的差異點同上述兩組基本相似；模型組與對照組無明顯差異。 (3)鑒定了治療組和對照組SAMP8顳葉組織的差異表達大于2倍的蛋白質點如10個，如肌動蛋白解聚因子-1、硫氧還原過氧化酶-6、肽基脯氨酸順反異構酶A、二甲基精氨酸

5、二甲基氨基水解酶-1、電壓依賴性陰離子通道2、浮艦蛋白1、高遷移率族蛋白B1等。根據(jù)SWISS-PROT和NCBI數(shù)據(jù)庫中提供的信息，這些差異蛋白質的功能涉及抗氧化應激、信號轉導、分子伴侶及細胞骨架等，與阿爾茨海默病病變密切相關。 結論： (1)益智健腦顆?？烧{節(jié)SAMP8顳葉組織多種蛋白質表達，提示該方藥具有多靶點的作用。 (2)益智健腦顆粒可能通過抗氧化應激、分子伴侶、調節(jié)NO、介導信號轉導、維護細胞骨架等途