1、一、真核表達(dá)TRAIL殺傷化療后殘存瘤細(xì)胞和耐藥細(xì)胞作用的研究;目的:探討不同化療藥物作用后的殘存小鼠肝癌細(xì)胞H22對(duì)TNF相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)誘導(dǎo)凋亡的敏感性,以及TRAIL對(duì)藥物抗性H22細(xì)胞的殺傷作用.結(jié)論:TRAIL不僅能有效殺傷ADM或MMC作用后的殘存H22腫瘤細(xì)胞,而且能殺傷ADM抗性的H22腫瘤細(xì)胞.5-FU與TRAIL聯(lián)合不會(huì)提高5-FU殺傷H22細(xì)胞的作用,處于G0/G1期的H22肝癌細(xì)胞對(duì)TRAIL誘導(dǎo)的

2、凋亡不敏感.二、TRAIL、CH50多肽及endostatin多基因聯(lián)合化療治療小鼠肝細(xì)胞腫瘤的研究;目的:觀察TNF相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)、CH50多肽及endostatin基因的真核表達(dá)質(zhì)粒mTRAIL-pcDNA3.1(pTRAIL)、pCH510、endostatin-pcDNA3.1(pES)聯(lián)合化療治療小鼠腫瘤的療效,探討腫瘤綜合治療的可行性.結(jié)論:MMC+pTRAIL+pES+pCH510能有效抑制小鼠肝細(xì)胞腫瘤生

3、長(zhǎng),是一種極具潛力的腫瘤綜合治療配伍方案.三、小鼠可溶性TRAIL原核表達(dá)質(zhì)粒msTRAIL-pRSET的構(gòu)建與表達(dá);目的:應(yīng)用原核表達(dá)系統(tǒng)大量制備可溶性TRAIL蛋白.方法:以小鼠全長(zhǎng)TRAIL真核表達(dá)質(zhì)粒為模板,PCR擴(kuò)增其可溶性片段(114aa~291aa),插入原核表達(dá)載體pRSET-B中,得到目的克隆,將其導(dǎo)入工程菌BDPS中,經(jīng)IPTG誘導(dǎo),SDS-PAGE檢測(cè)重組蛋白的表達(dá).結(jié)論:構(gòu)建的msTRAIL-pRSET能夠表達(dá)目