1、目的：
　　探討MDA-MB-231細胞經(jīng)無血清培養(yǎng)富集三陰性乳腺癌干細胞。
　　方法：
　　將MDA-MB-231乳腺癌細胞進行微球體培養(yǎng)，取培養(yǎng)第7-9天的微球體,判斷干細胞富集的程度；比較不同細胞濃度對癌球細胞成球率影響；干細胞表型CD44+CD24-/low流式細胞儀的測定; Western blot法分析癌球與貼壁細胞CXCR4蛋白表達；單個癌球細胞再成球能力；觀察癌球與貼壁細胞集落形成。
　　結(jié)果：<

2、br>　?。?).在含20ng/ml EGF,10ng/ml bFGF,2％b27無血清培養(yǎng)基中可培養(yǎng)三陰性乳腺癌癌球，1*104/ml、2*104/ml、3*104/ml、4*104/ml、5*104/ml細胞濃度癌球細胞成球率分別為（5.61±0.02）%、（3.23±0.54）%、（2.28±0.48）%、（1.05±0.13）%、（0.91±0.01）%，組間比較差異有統(tǒng)計學意義，P值均＜0.05。
　?。?).貼壁 MD

3、A-MB-231細胞與癌球細胞 CD44+CD24-/low含量分別為（38.54±2.00）%VS(66.35±2.06）%，差異有統(tǒng)計學意義，P=0.003。
　?。?).癌球細胞CXCR4蛋白表達高于貼壁MDA-MB-231細胞，灰度掃描分析差異有統(tǒng)計學意義，P=0.03。
　?。?).單個癌球細胞具有再成球能力。
　?。?).軟瓊脂糖集落形成能力癌球需200個細胞即可見集落形成，而貼壁細胞需1000個MDA-M