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文檔簡介
1、 轉移因子(transferfactor,TF)是從淋巴細胞中提取的一類低分子肽與核苷酸復合物,它能夠將供體的細胞免疫功能轉移給受體,尤其是非特異性TF能夠提高受體天然免疫和特異性免疫功能的特性使其在人類和多種動物疾病防治中獲得普遍應用。弄清TF增強犬免疫功能的細胞和分子機制,無疑將為TF臨床用于犬病尤其是犬傳染病的防治提供理論依據和指導。 本研究首先提取制備了研究所需要的豬、犬TF,然后選擇雜種牧羊犬作為實驗犬,用MTT法檢測了
2、實驗犬注射豬TF、犬TF前后不同時間的淋巴細胞增殖效果、用流式細胞術檢測了T細胞亞群的動態(tài)變化。試驗獲得如下結果: 1.制備的豬TF、犬TF理化性質相似,制備的TF可供本研究使用?! ?.淋轉試驗中,探討不同濃度犢牛血清(FCS)、淋巴細胞、植物血凝素P(PHA-P)和刀豆蛋白A(ConA)對犬淋巴細胞增殖的影響。確定了犢牛血清含量為10﹪,淋巴細胞濃度為5×106個/mL,用絲裂原PHA-P刺激的最佳濃度為12.5μg/mL時,
3、MTT法測定能夠刺激犬淋巴細胞轉化增殖,但t檢驗分析表明其促進淋巴細胞增殖的效果并不顯著;當其它條件不變,所用的絲裂原為ConA時,它在濃度為0.5~2.5μg/mL范圍內均可以顯著刺激T細胞的增殖(P<0.05),且在濃度為2.5μg/mL時刺激效果最佳?! ?.同種、異種TF均可以單獨刺激犬淋巴細胞增殖,但同種TF的作用效果要優(yōu)于異種TF。在分別協同PHA-P和ConA刺激淋巴細胞增殖時,同種、異種TF均可以刺激T細胞發(fā)生增殖作用
4、,只是顯著增殖的范圍不同。注射異種TF后,在6~10d內,犬淋巴細胞單獨增殖的能力越來越強。注射了異種TF的犬,其淋巴細胞再次受到TF單獨或協同絲裂原刺激時,淋巴細胞的增殖能力呈現早期(4~6d)下降趨勢,后期(6d后)受到抑制的現象。 4.同種、異種TF均可提高犬外周血淋巴細胞數量,CD4/CD8比值變化分析證實外周血增加的淋巴細胞中主要為CD4+T細胞。犬注射同種、異種轉移因子后在20d內CD4+T細胞呈現持續(xù)增加的規(guī)律。同種T
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