1、農作物副產品如秸稈等含有很高的纖維素成分,是一種潛在的自然資源,在全球資源危機的今天,利用其大力發(fā)展畜牧業(yè),不僅可以充分利用資源,還能避免因秸稈燃燒對生態(tài)環(huán)境造成的污染。利用纖維素酶分解纖維素是利用纖維素資源的有效手段之一,目前產纖維素酶菌株多分離自反芻動物瘤胃液、堆肥、土壤等,所得降解纖維素能力較強的菌株多為厭氧菌株,由于培養(yǎng)條件嚴格,在生產中的應用得到限制。本研究以竹鼠腸道內容物作為微生物來源,從中分離篩選出優(yōu)良的兼性厭氧產纖維素酶

2、菌株,為最大限度開發(fā)利用纖維素資源奠定基礎,同時促進新能源、食品、以及畜牧業(yè)等相關行業(yè)的快速發(fā)展。本研究主要包括以下四部分內容:
　　試驗一:通過嚴格厭氧結合需氧培養(yǎng),以羧甲基纖維素鈉為唯一碳源對竹鼠腸道內容物進行涂布培養(yǎng),初步分離出具有降解纖維素能力的菌株后,結合剛果紅染色以及酶活測定復篩出所需目的菌株。試驗結果顯示,從竹鼠回腸、盲腸、結腸共得到17株菌株,根據菌株形態(tài)篩選出7株疑似纖維素降解菌,分別為來自竹鼠回腸的H-1、H-

3、2菌株;盲腸的M-1、M-2、M-3菌株;結腸的J-1、J-2菌株;結合剛果紅染色法所得到的透明圈與菌落直徑比,測定其發(fā)酵液酶活后,顯示M-2、M-3酶活較高,分別為0.5029 U/mL、0.4874 U/mL。
　　試驗二:將來自盲腸的M-2、M-3菌株作為目的菌株,通過形態(tài)學觀察、革蘭氏染色觀察,菌株生理生化實驗,以及分子生物學鑒定確定該菌的種或屬。試驗結果證明:來自于竹鼠盲腸的M-2、M-3菌株的形態(tài)學特征觀察結果,結合生

4、理生化實驗,并分別利用PCR對其16SrDNA序列擴增,經過克隆、測序后,在 Genbank數據庫里面 BLAST結果表明,M-2屬于腸桿菌科的沙雷氏菌屬(Serratia),M-3菌株確定為肺炎克伯雷氏菌(Klebsiella pneumoniae)。
　　試驗三:挑選酶活相對較高的來自盲腸的M-2菌株作為目的菌株,測定不同發(fā)酵時間、碳源、氮源、接種量、溫度及初始pH值對菌株M-2產酶活性的影響,對其產酶性質進行研究。試驗結果表