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文檔簡介
1、西瓜根腐病是由半知菌亞門真菌引起的病害,近年來逐漸成為我國西瓜產區(qū)的主要病害之一,據(jù)報道自根西瓜和嫁接西瓜都可以感病,造成了嚴重的經濟損失。嫁接技術是防治西瓜根部病害發(fā)生的有效手段,目前我國嫁接西瓜的普及率達到了40%,但是生產上發(fā)現(xiàn)嫁接后的西瓜仍會發(fā)生根腐病,且有逐年加重的趨勢。目前相關的研究比較少,關于西瓜根腐病病原學及防治方法的系統(tǒng)研究還是空白。本試驗通過對西瓜根腐病菌的分離和鑒定,生物學特性,侵染途徑和防治方法的研究,旨在弄清西
2、瓜根腐病的致病菌及其生物學特性、探究西瓜根腐病菌的侵染途徑并提出科學合理的防治方法,具體研究結果如下:
1.采用常規(guī)組織分離及單孢純化的方法共獲得了53個分離物,通過形態(tài)學觀察,參照Nelson鐮刀菌分類系統(tǒng)進行鑒定,初步將分離物鑒定為茄病鐮刀菌(F.solani)、F.commune、串珠鐮刀菌(F.verticillioide)、層出鐮刀菌(F.proliferatum)。其中,F(xiàn).solani有23個、F.commune
3、有15個、F.verticillioide有8個、F.proliferatum有7個,分別占44.3%、28.5%、15.1%、13.2%。
2.采用孢子懸浮液蘸根接種法(106個/mL)對53個分離物進行致病性驗證,篩選出致病菌Fs-8。采用EF-1α基因序列分析對結果進行了驗證,發(fā)現(xiàn)Fs-8與F.solani(FN689821.1、FN689824.1、FN689827.1)相似率高達100%;采用MEGA5.0軟件以Ne
4、ighbor-Joining法構建系統(tǒng)進化樹,結果表明Fs-8與F.solani的親緣關系最近,位于進化樹的同一支,與形態(tài)學鑒定結果一致。
3.采用接種法和特異性引物對病原菌的專化型和生理小種進行了鑒定,結果表明Fs-8對西瓜、南瓜、葫蘆幼苗和西瓜果實都具有致病性。采用茄病鐮刀菌瓜類?;?號生理小種特異性引物(Fsc1-EF1/Fsc1-EF2)進行驗證,可以獲得預期的特異性條帶(505bp)。最終將西瓜根腐病的病原菌鑒定為
5、茄病鐮刀菌瓜類?;?號生理小種(Fusariumsolanif.sp.cucurbitaerace1)。
4.采用PDA培養(yǎng)基和真菌生理培養(yǎng)基,分別研究了不同溫度、pH、碳源、氮源對Fs-8生長和產孢的影響,結果表明最適合該菌生長和產孢的溫度范圍是28℃~30℃;pH范圍是5~10;該菌可以利用多種碳源;在KNO3,Ca(NO3)2,NaNO3等硝態(tài)氮源培養(yǎng)基上生長的較好,在(NH4)2SO4,NH4Cl等銨態(tài)氮源上生長的最
6、較差。
5.采用組織化學染色的方法,研究了Fs-8侵染途徑。結果表明Fs-8通過傷口進入西瓜根部以后,首先以菌絲在皮層薄壁細胞間隙緩慢擴展,使細胞破潰;進而在細胞破潰的部位產生厚垣孢子;接著厚垣孢子轉移到新的部位并萌發(fā)形成菌絲,繼續(xù)進行侵染。
6.采用含毒介質法,研究了甲基托布津、多菌靈、代森錳鋅、苯醚·咪鮮胺、世高、綠亨一號、拿敵穩(wěn)7種化學藥劑對Fs-8生長的抑制作用。抑菌效果最好的是苯醚·咪鮮胺、拿敵穩(wěn)和多菌靈,
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