圍產期山羊子宮頸糖皮質激素受體、合成酶定位及脂肪細胞定位研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、糖皮質激素是哺乳動物分娩啟動的重要激素,不僅可以引起子宮收縮力的改變,通過多種途徑參與分娩,而且在分娩啟動時各種激素間相互協調中發(fā)揮著樞紐作用。它主要由腎上腺皮質分泌,現已證明其他部位如胎盤、卵巢、子宮等組織器官也可分泌,包括皮質醇和皮質酮,牛、羊等所分泌的90%以上是皮質醇。糖皮質激素必須與其受體相結合才能發(fā)揮作用。糖皮質激素受體分為GRα和GRβ,主要以GRα形式存在。參與糖皮質激素活性轉化的酶類主要是11β-羥基類固醇脫氫酶(11

2、β-HSD)。11β-HSD分為11β-HSD1、11β-HSD2兩種。11β-HSD1是氧化還原酶,以還原作用為主,可使無活性的可的松還原為有活性的皮質醇。11β-HSD2是專一性氧化酶,使有生物活性的皮質醇轉變?yōu)闊o活性的可的松。
  目前國內外就糖皮質激素受體、合成酶在圍產期山羊子宮頸中的定位以及mRNA表達與分娩前后子宮頸收縮和舒張的關系是否一致的研究較少,資料仍然缺乏。為了闡述上述問題,本試驗分別采集健康山羊產前兩天、產前

3、一天、分娩期、產后一天以及產后兩天的子宮頸,用Western Blot法檢測兔抗人糖皮質激素受體蛋白(NR3C1)多克隆抗體,兔抗人11β-HSD1多克隆抗體及兔抗人11β-HSD2多克隆抗體在圍產期山羊子宮頸組織中的特異性;用免疫組織化學法分別對NR3C1、11β-HSD1和11β-HSD2進行定位;用RT-PCR法檢測NR3C1、11β-HSD1、11β-HSD2 mRNA的相對表達水平;用油紅O染色法來檢測各時期子宮頸中脂肪細胞的

4、分布。結果顯示:NR3C1、11β-HSD1、11β-HSD2在圍產期山羊子宮頸中除黏膜上皮和漿膜層外均有分布,以子宮頸平滑肌和血管平滑肌中分布最多。通過檢測其陽性率可發(fā)現NR3C1、11β-HSD1在分娩期最多,而11β-HSD2在產后一天最多。NR3C1、11β-HSD1 mRNA在分娩期表達水平最高,而11β-HSD2 mRNA表達水平在產后一天最高。脂肪細胞在整個圍產期均有分布,主要存在于山羊子宮頸的肌間、血管、腺管基底層以及黏

5、膜上皮下。在分娩期為大脂滴,其他四期為小脂滴。結果表明,脂肪細胞中的脂滴由小變大為分娩時子宮頸擴張?zhí)峁┠芰?,同時脂肪細胞中含有甘油和膽固醇酯,而膽固醇是合成類固醇激素的原料,而且試驗證明了子宮頸本身含有糖皮質激素的合成酶與受體,并且陽性率與mRNA表達水平相一致,這就證明子宮頸是一個獨立的內分泌組織,能合成與分泌糖皮質激素。血管和子宮頸平滑肌中的糖皮質激素受體與合成酶的含量在分娩期時最多,意味著合成的糖皮質激素多,然后作用于本身,從而使

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