綠竹及擬南芥SEP3蛋白原核表達(dá)、純化及寡聚體分析.pdf_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩76頁(yè)未讀 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、竹類資源豐富,研究和開(kāi)發(fā)利用的空間巨大。有關(guān)竹子開(kāi)花生理過(guò)程的研究一定程度上受取樣困難和相關(guān)基因組信息缺乏的限制,因此研究竹子開(kāi)花中的關(guān)鍵因子是非常必要的。植物體內(nèi)SEPALLATA3蛋白(簡(jiǎn)稱SEP3)與其他蛋白或元件組裝成多聚體復(fù)合物,SEP3蛋白自身或與其它蛋白是如何組裝的,形成什么樣的空間復(fù)合物尚不清楚,但其在植物開(kāi)花生長(zhǎng)中具有非常重要的作用。
   本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建了綠竹和擬南芥SEP3蛋白的原核表達(dá)載體,純化可溶性SEP3

2、蛋白并進(jìn)行體外功能結(jié)構(gòu)試驗(yàn),探究SEP3蛋白結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系及多聚體的形成機(jī)制。主要結(jié)果如下:
   1.成功構(gòu)建得到不同結(jié)構(gòu)域的原核表達(dá)SEP3蛋白載體,以pET-15b為表達(dá)載體,Rosetta為宿主表達(dá)細(xì)菌,20℃條件下1% IPTG誘導(dǎo)15h,純化得到了高純度的擬南芥和綠竹的M-domain SEP3蛋白、IK-domain SEP3蛋白和SEP3包涵體蛋白。
   2.通過(guò)基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜MALD

3、I-TOF-MS指紋圖譜分析,Mascot程序?qū)⒌玫降亩嚯钠闻cSwissProt數(shù)據(jù)庫(kù)信息比對(duì),驗(yàn)證原核表達(dá)蛋白為SEP3蛋白。
   3.SEP3蛋白N端具有與DNA特異性結(jié)合的M區(qū),本實(shí)驗(yàn)將純化得到的M-domain SEP3蛋白與啟動(dòng)子特異序列CArG-box DNA結(jié)合,通過(guò)凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了SEP3蛋白具有結(jié)合DNA的活性。
   4.分析凝膠過(guò)濾層析峰圖顯示綠竹和擬南芥SEP3蛋白具有多聚性,體外戊二醛交聯(lián)

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論