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文檔簡(jiǎn)介
1、植物激素脫落酸(ABA)調(diào)節(jié)植物多種生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程,包括種子貯藏蛋白的合成、種子耐脫水性與休眠、種子的萌發(fā)、幼苗的生長(zhǎng)以及調(diào)節(jié)植物對(duì)各種脅迫的反應(yīng)。當(dāng)植物受到各種環(huán)境脅迫如干旱、高鹽和寒冷等時(shí),其體內(nèi)會(huì)合成和積累ABA。SnRK蛋白激酶是廣泛存在于植物中的一類Ser/Thr類蛋白激酶,參與植物體內(nèi)多種信號(hào)途徑的轉(zhuǎn)導(dǎo),在植物的抗逆境生理過(guò)程中扮演了重要角色。因此闡明ABA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中SnRK的功能具有重要意義。
本研究以徐稻4號(hào)粳稻
2、品種作為研究對(duì)象,研究了水稻基因組中與擬南芥SnRK2.6基因同源的SAPK8~10基因在ABA和H2O2處理下基因表達(dá)與激酶活性的變化進(jìn)程、SAPK8~10激酶的亞細(xì)胞定位及其對(duì)Osrbohs的關(guān)系。主要研究結(jié)果如下:
外源ABA(100μM)處理水稻葉片1h能顯著提高SAPK8~10的激酶活性,但并不影響其基因表達(dá)量;外源H2O2(10mM)處理30min能也顯著提高SAPK8~10的激酶活性,且早于ABA的激活時(shí)間。
3、r> 利用原生質(zhì)體瞬時(shí)表達(dá)與瞬時(shí)沉默體系和熒光定量PCR技術(shù)研究SAPK8~10基因的過(guò)表達(dá)與基因沉默對(duì)水稻NADPH氧化酶基因Osrbohs的影響。結(jié)果顯示,SAPK8~10基因的過(guò)表達(dá)與沉默對(duì)Osrbohs的轉(zhuǎn)錄水平?jīng)]有明顯誘導(dǎo)。
利用基因重組技術(shù)將SAPK8~10基因的編碼序列構(gòu)建到pXZP008真核瞬時(shí)表達(dá)載體中,采用PEG融合法轉(zhuǎn)化水稻原生質(zhì)體細(xì)胞,以黃色熒光蛋白基因?yàn)閳?bào)告基因,通過(guò)激光共聚焦顯微鏡觀察亞細(xì)胞定位。
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