轉基因大豆分子檢測技術方法的建立與應用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、隨著生物基因工程技術的發(fā)展,轉基因技術在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展中起著不可替代的作用,越來越多轉基因農(nóng)作物,在全球范圍內(nèi)大面積種植。
  本文以轉基因大豆為實驗材料,對轉基因的檢測方法進行初步的研究。大豆是人類食品中主要的植物蛋白來源,是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)十分重要的農(nóng)作物之一,但隨著人們生活水平的提高,大豆的產(chǎn)量逐漸開始無法滿足人們的生活需求,利用轉基因技術是增加大豆產(chǎn)量最有效的途徑之一。自首次報道大豆成功轉化以來,很多研究人員相繼進行大豆轉化方面的成

2、功報道。隨著轉基因作物商業(yè)化的種植,轉基因作物的安全性,引起了人們的密切關注。因此,為了消費者的權益,轉基因植物的檢測是轉基因研究的必須環(huán)節(jié),只有準確地檢測轉基因含量以及成分,才能有效的對轉基因作物進行實時監(jiān)控。本文主要工作如下:
  1.用定性PCR方法檢測了轉基因大豆中CaMV35啟動子,NOS終止子,NPTⅡ基因等通用元件,初步判斷是否為陽性轉基因大豆,為后面特異性的定性檢測奠定基礎。
  2.根據(jù)轉基因大豆目基因Gm

3、CBL和NAC5和CaMV35S啟動子序列設計兩個引物,建立了轉基因大豆GmCBL和NAC5的品系特異定性PCR檢測方法.這種方法所檢測的PCR產(chǎn)物既包含了作物基因組序列,又包含了目的基因的序列,是高度特異的,并對其PCR產(chǎn)物檢測測序驗證,排除了由于植物花椰菜花葉病毒感染等因素所導致的假陽性結果。
  3.在定性檢測的基礎上,以轉基因大豆Gm7α亞基為研究對象,利用絕對定量的實時熒光定量PCR法檢測轉基因大豆的拷貝數(shù),以Tubul

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