大豆子葉節(jié)對氯化鋰的敏感性研究及大豆GmDof11基因的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、在植物的許多生長發(fā)育階段,Dof轉(zhuǎn)錄因子都扮演了重要的角色。植物的基因組中包括許多編碼Dof蛋白的基因:擬南芥中報道的Dof轉(zhuǎn)錄因子家族中基因有36個;水稻中報道的Dof轉(zhuǎn)錄因子家族包括30個Dof基因;大豆中報道的Dof轉(zhuǎn)錄因子家族中基因有28個。研究表明:大豆中GmDof4和GmDof11基因的過表達能夠提高轉(zhuǎn)基因擬南芥種子的總脂肪含量,同時也提高了千粒重(Wang等,2007)。
   CAX基因家族被證明具有可以提高植物

2、對重金屬離子抗性的潛能。研究表明:轉(zhuǎn)到擬南芥中的GmCAX1基因是植物體內(nèi)與Li離子等離子相關(guān)的逆向轉(zhuǎn)運蛋白,它通過調(diào)節(jié)植物體內(nèi)的離子平衡,從而調(diào)控植物的耐鹽性(羅光佐等,2005)。
   本實驗將獲得的pROK2-GmCAX1-GmDof11載體通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法將GmDof11基因?qū)氪蠖怪?,一方面利用GmCAX1基因的耐鋰性,用氯化鋰作為篩選劑以替代傳統(tǒng)的抗生素,化解了抗生素作為大豆轉(zhuǎn)基因篩選劑的弊端;另一方面,選用G

3、mDof11基因作為目的基因轉(zhuǎn)入大豆中以期許提高大豆種子的總脂肪含量。此外,本研究還探討了大豆子葉節(jié)對植物耐鋰載體的敏感性,摸索了大豆遺傳轉(zhuǎn)化體系以提高轉(zhuǎn)化率,并通過該體系將GmDof11基因?qū)氪蠖怪胁⑦M行初步鑒定。
   本實驗獲得主要結(jié)果如下:
   1.轉(zhuǎn)基因體系的摸索:本研究以2個大豆品種為材料,研究了種子滅菌條件,萌發(fā)條件、誘導(dǎo)培養(yǎng)基、激素濃度對大豆子葉節(jié)再生的影響,以建立一個大豆子葉節(jié)高效再生體系用于大豆的

4、遺傳轉(zhuǎn)化。結(jié)果表明,大豆種子滅菌以5~7h為宜;大豆種子萌發(fā)天數(shù)對叢生芽分化有影響,以萌發(fā)5d為宜;萌發(fā)培養(yǎng)基加入普通瓊脂,并將大豆種臍朝同一方向擺放為宜;大豆子葉節(jié)叢生芽誘導(dǎo)時BAP的濃度為2 mg/L、叢生芽生根時IBA濃度以1.5 mg/L為宜。
   2.子葉節(jié)對氯化鋰敏感性的研究結(jié)果:88-1和猴子毛這兩個大豆品種褐化的臨界濃度分別為1.0mM和1.4mM;氯化鋰不同濃度之間、基因型之間差異顯著,即試驗中注意不同基因型

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