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文檔簡介
1、隨著飼用抗生素的濫用所導致的耐藥性、藥物殘留、環(huán)境等問題的出現(xiàn),抗生素替代品的研究成為熱點。微生態(tài)制劑是通過改善宿主腸道內的微生態(tài)平衡從而發(fā)揮益生作用的生物制品,芽孢桿菌是微生態(tài)制劑的一種,其能形成內生孢子,具有強耐受性等優(yōu)點。
本研究從健康仔豬的糞便中分離篩選出對腸道常見病原菌具有拮抗作用的豬源益生芽孢桿菌、然后對其益生特性和安全性進行研究,得到一株安全無毒且具有良好益生性能的蠟樣芽孢桿菌 BC158,并通過單因素試驗和響應
2、面設計優(yōu)化其發(fā)酵工藝,從而獲得高密度培養(yǎng)工藝,具體研究結果如下:
1、從健康仔豬(15-40日齡)糞便中分離到46株芽孢桿菌,通過對腸道常見病原菌拮抗性研究,篩選到3株能夠拮抗病原菌(大腸桿菌 O8、腸炎沙門氏菌和金黃色葡萄球菌)的芽孢桿菌,然后通過生理生化實驗和16SrDNA序列分析,結果表明,3株菌都是蠟樣芽孢桿菌,分別命名為芽孢桿菌BC158、BC234、BC236。
2、對篩選到的三株蠟樣芽孢桿菌 BC158
3、、BC234、BC236的益生性和安全性進行了研究,結果表明, BC158具有最好的潛在益生性,如粘附和抑菌性,且安全無毒,使其在動物飼料工業(yè)中具有良好的應用前景。BC158對前腸、中腸、后腸粘液的的粘附率分別為39.68%、33.49%和33.25%。能夠耐受 pH1和0.9%的膽鹽環(huán)境。在所測試的獸用常用抗生素中,均有不同程度的敏感。且BC158能產生淀粉酶、蛋白酶和纖維素酶。同時蠟樣芽孢桿菌腸毒素(BCET)的檢測結果表明,BC1
4、58為腸毒素陰性。接下來對 BC158進行了小鼠飼喂試驗,飼喂三周期間試驗組小鼠生長良好,無腹瀉嘔吐情況出現(xiàn),且對小鼠的生長性能有較大的影響,如日增重明顯提高;小鼠解剖也未見任何消化道病變,試驗組小鼠的免疫指數(shù)(胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù))較對照組明顯提高,表明 BC158能刺激小鼠免疫臟器的發(fā)育,提高小鼠的免疫力。
3、對 BC158的高密度發(fā)酵工藝進行了研究。結果表明,該菌的最佳發(fā)酵條件為:溫度37℃,pH7.2,搖床轉速180r
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