1、基因的表達在很大程度上受其啟動子與其特定的順式作用元件的互作所決定，分析啟動子的表達調(diào)控規(guī)律是明確基因功能的重要途徑。植物在長期的進化過程中，發(fā)展了誘導(dǎo)型抗性，將對病原菌等逆境抗性限制在特定的條件下以減少不必要的物質(zhì)和能量的浪費并減少能殺菌的有毒次生代謝物對植物細胞本身的毒害作用。因此，分析植物抗病基因的啟動子不僅有利于闡明植物抗病基因的功能，還可為植物抗病基因工程改善外源抗病基因的表達提供有應(yīng)用價值的誘導(dǎo)型啟動子。鑒于此，本項目通過獲

2、得啟動子與GUS報告基因載體的轉(zhuǎn)基因水稻的T1代株系，分析了水稻抗稻瘟病基因Pita和對病原菌等逆境脅迫表現(xiàn)出明顯應(yīng)答作用的水稻錨蛋白基因的啟動子，旨在分析上述基因在水稻中的表達規(guī)律，明確其作為誘導(dǎo)型啟動子應(yīng)用于水稻抗病基因中的可能性。主要結(jié)果如下：
　　 1、水稻錨蛋白基因啟動子的功能分析：根據(jù)網(wǎng)上預(yù)測的水稻錨蛋白基因設(shè)計引物從水稻(粳稻品種日本晴)中擴增了該基因的啟動子片段，稱其為OsANKp，將其啟動子序列放在啟動子順式作

3、用元件預(yù)測網(wǎng)站PALCE上進行分析，預(yù)測到了10多個可能存在的元件。構(gòu)建了OsANKp：：GUS表達載體，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化水稻獲得了一定數(shù)量的轉(zhuǎn)基因株系。
　　 轉(zhuǎn)基因植株可受機械損傷、稻縱卷葉螟、稻瘟病處理的誘導(dǎo)表達，并且隨著時間的增長，GUS的表達強度也隨之增強。
　　 2、水稻稻瘟病抗性基因Pita啟動子的功能分析：根據(jù)網(wǎng)上預(yù)測的水稻Pita基因設(shè)計引物從水稻(粳稻品種日本晴)中擴增了該基因的啟動子片

4、段，稱其為OsPITAp，將其啟動子序列放在啟動子順式作用元件預(yù)測網(wǎng)站PALCE上進行分析，預(yù)測到了20多個可能存在的元件。構(gòu)建了OsPITAp：：GUS表達載體，利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化水稻獲得了一定數(shù)量的轉(zhuǎn)基因株系。
　　 在T1代OsPITAp轉(zhuǎn)基因植株中，莖和葉中沒有發(fā)現(xiàn)GUS基因的表達，根部有少量的表達，去殼的種子和谷殼中GUS基因也有少量的表達，本研究中轉(zhuǎn)基因植株對機械損傷、稻瘟病沒有應(yīng)答；GUS定量分析發(fā)現(xiàn)M