主要梨品種細(xì)胞質(zhì)遺傳多態(tài)性分析.pdf_第1頁(yè)
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1、梨屬于薔薇科的梨亞科,品種很多,長(zhǎng)期以來(lái)在分類上存在很多的問(wèn)題。本論文的目的是研究主要梨品種細(xì)胞質(zhì)遺傳多態(tài)性。采用PCR-RFLP方法,對(duì)提取出的總DNA用10對(duì)葉綠體通用引物進(jìn)行擴(kuò)增,對(duì)PCR產(chǎn)物用限制性內(nèi)切酶AluI,HaeIII,HinfI,Hin6I,RsaI,MvaI和TaqI進(jìn)行酶切,對(duì)19種梨(包括新疆梨系統(tǒng)、白梨系統(tǒng)、西洋梨系統(tǒng)、秋子梨系統(tǒng)、杜梨、沙梨系統(tǒng))的葉綠體基因組trnS-trnfM非編碼區(qū)進(jìn)行克隆、測(cè)序。應(yīng)用D

2、PS v7.05和DNAMAN、DNAStar、ClustalX-1.83、PHYLIP-3.68軟件進(jìn)行分析。通過(guò)序列比對(duì),再進(jìn)行聚類分析,最后依據(jù)所得結(jié)果確定所測(cè)分子序列的親緣關(guān)系,構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。
   結(jié)果顯示:10對(duì)引物中只有7對(duì)(cp01,cp 02,cp 03,cp 04,cp 06,cp 09,cp 10)能在梨屬植物上擴(kuò)增出一條特異性譜帶,這說(shuō)明梨屬植物葉綠體基因組序列十分保守,3個(gè)引物對(duì)(cp05,cp07,

3、cp08)不能在梨屬植物上擴(kuò)增出譜帶。931份引物對(duì)/酶切組合中,cp09/MvaI,cp03/Hin6I的酶切位點(diǎn)有顯著差異。
   對(duì)梨屬植物的cpDNA trnS-trnfM區(qū)域進(jìn)行克隆、測(cè)序,所得的序列長(zhǎng)度為: 庫(kù)爾勒香梨和鴨梨的序列最長(zhǎng)(1642bp),蘋果梨、早酥梨、慈梨、象牙、翠伏的序列最短(1272bp)。
   用DNAMAN軟件對(duì)序列進(jìn)行比對(duì)分析:庫(kù)爾勒香梨與白梨系統(tǒng)的同源性為:85.01%,與新疆梨

4、系統(tǒng)的同源性為:78.60%,與西洋梨系統(tǒng)的同源性為:78.28%,與沙梨系統(tǒng)的同源性為:77.47%,與秋子梨系統(tǒng)的同源性為:77.91%。
   根據(jù)ClustalX軟件完全比對(duì)的結(jié)果,用PHYLIP-3.68軟件的鄰接法對(duì)cpDNA trnS-trnfM區(qū)域序列變異位點(diǎn)構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。黑酸梨和京白聚為一類,伏茄和身不知聚為一類,冬巴和新世紀(jì)聚為一類。庫(kù)爾勒香梨和新疆句句梨、金川雪梨、京白、黑酸梨聚為一類。
   本

5、實(shí)驗(yàn)的主要結(jié)論:庫(kù)爾勒香梨與蘋果梨,鴨梨,早酥,慈梨,碭山梨,金川雪梨,新疆句句梨,錦豐的平均距離系數(shù)較小,與其他梨的平均距離系數(shù)較大。
   早酥是蘋果梨和身不知雜交出來(lái)的品種。早酥與蘋果梨的同源性為:99.45%,與身不知的同源性為:97.76%。錦豐是蘋果梨和慈梨雜交出來(lái)的品種。錦豐與蘋果梨的同源性為:78.76%,錦豐與慈梨的同源性為:78.71%。和父本相比,后代和母本的同源性較高。庫(kù)爾勒香梨在與18種梨的序列比對(duì)中,

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