1、據珠青蟹銳皮抑制激紊cDNA分子克隆及序列分析鋸緣青蟹蛻皮抑制激素cDNA分子克隆及序列分析摘要本文采用逆轉錄一聚合酶鏈式反應(RTPCR)方法，從鋸緣青蟹的眼柄神經節(jié)總cDNA序列，經克隆后、RNA中擴增出編碼蛻皮抑制激素(MIH)的肚及部分信號肚，長度為測序，結果表明，該。DNA編碼MIH成熟3166pRNA斑點雜交實驗顯示，MIH基因在眼柄神經節(jié)及腦組織中均有表達，而在肌肉、肝胰臟中不表達。滬得到的核昔酸序列以及由此推導的氨基酸序

2、列分”11t1GENBANKSWISSPROT數據庫進行同源序列查找，結果顯示鋸緣青蟹cDN人序列及由此推導的氨基酸序列與美洲藍蟹的相似性最高，為90%以上，與短尾類中其它物種的MTH的相似性也較高，可達到79.5%89%。使用ClustalWMEGA生物軟件對己知MIH進行系統(tǒng)進化分析，發(fā)現除個別物種外，MIH的分子系統(tǒng)樹與物種的傳統(tǒng)進化樹基本一致。使用ComputepIMwSAPSPredictProtein等生物軟件對鋸緣青蟹的M

3、IH進行序列分析、理化性質及結構的預測，發(fā)現預測的MIH的分子量及等電點與其它短尾類的MIH極為接近，MIH為球狀蛋白，具有潛在的翻譯后修飾現象，可為選擇合適的體外表達載體及表達產物的分離純化提據蛛青蟹蛻皮抑制漱素CDN^分子克隆及序3.1全竺MolecularCloningandSequenceAnalysisofaMoltInhibitingHormonecDNAinthemudcrabScyllaserrataABSTRACTBy

4、meansofreversetranscriptionpolymerasechainreaction(RTPCR)afragmentofcDNAencodingmoltinhibitinghormone(MIH)wasamplifiedfromthetotalRNAofeyestalkneuralgangliaofthemudcrabScyllaserrata.ThenthefragmentwasclonedintopUCmTvecto

5、randsequenced.Thetotallengthofthesequencewas316bpincludingasequenceencodingmaturepeptideandapartialsequenceencodingsignalpeptide.TheresultsofRNAdothybridizationshowedthattheMIHgenewasexpressedonlyintheeyestalkandbrainwit

6、houtinothertissuesofthemudcrabScyllaserrata.AccordingtothesearchresultsofGenBankandSwissprotdatabasesthecDNAfragmentandthededucedaminoacidsequence(onlymaturepeptideofMIH)share79.5%91.5%identitywiththatofotheranimalsinthe