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文檔簡介
1、目的:為探明不同時期不同家畜睪丸組織中干細胞的表達特點,分析不同時期牛、羊和豬睪丸的組織學特征及精原干細胞(SSCs)相關抗原Oct4、Nanog、C-kit和β1-integrin在睪丸組織中的分布規(guī)律。
方法:以2.5月胎齡、4月胎齡及1年、2年的黑白花奶牛;45同胎齡、75日胎齡以及4月齡的白山羊;60日胎齡和6月齡的三元雜交杜長大豬為試驗材料進行組織學HE染色和免疫組化法檢測。
結(jié)果:組織學觀察到從性
2、分化到出生發(fā)育過程中,早期胎兒階段的睪丸組織原始生殖細胞(PGCs)聚集程度高,呈明顯的團狀細胞集落,各細胞集落之間被支持細胞分隔,隨著年齡增長,呈梭形的肌樣細胞分布于生精小管外周,并將細胞團分隔開,形成生精小管,閉鎖狀態(tài)的管腔逐步增大,繼而形成腔隙。隨著腔隙的增大,緊貼于生精上皮基膜的部分精原細胞逐漸形成精子。
免疫組化表明Oct4、Nanog、C-kit和βi-integrin在不同的睪丸組織中,SSCs在越小胎齡的家
3、畜睪丸組織中含量越豐富,陽性細胞數(shù)量相對較多,隨著胎齡增長,家畜睪丸組織中陽性細胞數(shù)量相對減少。而家畜睪丸組織中SSCs仍然存在,但含量相對減少很多。其中,(1)Oct4的表達在各家畜睪丸組織中最為廣泛,Nanog與Oct4趨勢相同,但數(shù)量相對減少。其中,2.5、4月胎齡牛,45日胎齡羊睪丸組織中,陽性細胞表達于生精小管細胞團和睪丸間質(zhì)細胞中;75日胎齡羊和60日胎齡豬陽性表達呈環(huán)狀分布于生精小管周圍,睪丸間質(zhì)組成細胞中相對較少;1年牛
4、、4月齡羊陽性細胞分布于牛睪丸組織生精小管基底膜,在睪丸間質(zhì)中細胞數(shù)量較少或沒有;2年牛和6月齡豬僅在睪丸組織生精小管基底膜沒有或者少見陽性表達;(2)C-kit和β1-integrin可見膜表達。其中,在45日胎齡羊睪丸組織中,陽性細胞島嶼狀幾乎布滿生精小管細胞團和睪丸間質(zhì)細胞的胞膜;75日胎齡羊睪丸組織陽性細胞相對減少,膜表達于曲細精管的實質(zhì)部分;60日胎齡豬睪丸組織中,陽性表達于生精小管基膜處細胞,管周間質(zhì)細胞未見;2.5、4月胎
5、齡牛睪丸組織中,陽性細胞有明顯的團簇狀相連;4月齡羊、1年牛睪丸組織中陽性細胞相對減少,一般膜表達于曲細精管基底膜處,偶見管周間質(zhì)細胞有零星陽性細胞分布。6月齡豬睪丸組織中,C-kit陽性細胞相對減少,多見于管周間質(zhì)細胞胞膜,而β1-integrin則在曲細精管基膜處和管周間質(zhì)細胞均有表達。2年牛睪丸組織中,陽性表達較少,曲細精管內(nèi)偶見零星的胞膜表達,而在管周間質(zhì)細胞卻有少量膜表達。
結(jié)論:家畜SSCs從性腺分化一直存在于
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