壇紫菜對高溫脅迫應答機制的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究以耐高溫型壇紫菜Z-61 F4、Z-26 F4純系葉狀體作為實驗材料,以野生型壇紫菜葉狀體作為對照,分別從生長發(fā)育特征、生理生化指標以及基因差異表達等方面對壇紫菜葉狀體在高溫脅迫下的響應機制進行了初步研究。結(jié)果表明:
  1、生長發(fā)育特征方面:兩個耐高溫型壇紫菜品系葉狀體經(jīng)高溫(30℃、26℃)脅迫10d后,藻體顏色分別由正常溫度(21℃)時的紅褐色與褐紅色逐漸變淺,但將其轉(zhuǎn)入正常溫度下培養(yǎng)能夠基本恢復正常生長,而野生型壇紫

2、菜葉狀體經(jīng)30℃高溫脅迫2d后即出現(xiàn)細胞質(zhì)外溢、逐漸壞死的現(xiàn)象,轉(zhuǎn)至正常溫度下培養(yǎng)不能恢復正常生長;
  2、在品質(zhì)指標方面:本研究測定了2個耐高溫型F4與1個野生型壇紫菜葉狀體在30℃、26℃、21℃三個溫度下分別處理0d、2d、4d、6d、8d、10d后的5個品質(zhì)指標(藻膽蛋白、葉綠素a、粗蛋白、總氨基酸及游離氨基酸),3個品系在21℃下培養(yǎng)10d后各指標變化不顯著(P>0.05),30℃、26℃下多數(shù)指標動態(tài)變化,脅迫10d

3、后呈現(xiàn)顯著或極顯著降低(P<0.05或P<0.01),耐高溫型品系降低幅度較野生型??;
  3、在生理生化指標方面:測定了2個耐高溫型與1個野生型壇紫菜葉狀體在30℃、26℃、21℃三個溫度下分別處理0d、2d、4d、6d、8d、10d后的7個生理生化指標[自由基含量、過氧化氫(H2O2)含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、過氧化物酶(POD)活性、過氧化氫酶(CAT)活性及游離脯氨酸(Pro)含量],根據(jù)各

4、指標在脅迫周期內(nèi)的動態(tài)變化,推測耐高溫型壇紫菜葉狀體應答高溫脅迫的生理生化過程為:高溫脅迫→活性氧含量上升→細胞膜氧化受損,產(chǎn)生大量膜脂過氧化物→細胞感受到過量的活性氧信號→抗氧化系統(tǒng)和滲透壓調(diào)節(jié)系統(tǒng)共同響應,清除活性氧→自由基含量下降;同時比較了兩種壇紫菜對高溫脅迫的生理生化響應過程,發(fā)現(xiàn)耐高溫型壇紫菜在高溫脅迫下能同時啟動抗氧化系統(tǒng)和滲透壓調(diào)節(jié)系統(tǒng),而野生型壇紫菜則只能啟動滲透壓調(diào)節(jié)系統(tǒng),且兩種壇紫菜抗氧化系統(tǒng)的本底含量也存在著顯著

5、差異(P<0.05);
  4、利用引物退火控制技術(ACP),對耐高溫型壇紫菜Z-61 F4葉狀體脅迫6d后與正常溫度培養(yǎng)下的cDNA進行擴增篩選得到多個基因差異表達片段,并對其中6個(GW-1、GW-2、GW-3、GW-4、GW-5、GW-6)片段進行測序分析,片段大小分別為387bp、512bp、702bp、360bp、228bp與132bp,同源性比對發(fā)現(xiàn)這些基因與信號轉(zhuǎn)導、蛋白代謝等相關。對前5條基因進行實時熒光定量PC

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