1、小孢子培養(yǎng)技術能夠大大縮短育種年限、提高育種效率、加速育種進程。青海省氣候冷涼，能夠篩選出當地氣候條件下高成胚特早熟基因型材料對于油菜遺傳育種意義重大。雜種優(yōu)勢作為自然界一種普遍的生物學現象，是提高作物產量的一種有效途徑。而遺傳多樣性研究是種質資源評價和雜種優(yōu)勢利用的基礎，因此充分了解親本之間的遺傳差異，將親本材料劃分成不同的遺傳類群，有助于指導強優(yōu)勢雜交組合的選配，從而快速有效地利用雜種優(yōu)勢。長期以來，人們探討了雜種優(yōu)勢預測的多種方法

2、，但均表現一定的局限性，預測效果均不理想。近年來分子標記技術的發(fā)展與應用，為深入研究作物雜種優(yōu)勢提供了嶄新的方法和手段。
　　 本研究內容之一為：以19份特早熟春性甘藍型油菜進行小孢子培養(yǎng)，考察影響小孢子培養(yǎng)的因素。本研究內容之二為：用SSR標記研究62個DH系的遺傳多樣性，從分子水平揭示其遺傳差異；田間試驗研究重點考察31個DH系和其親本主要經濟性狀包括株高、單株角果數、每果粒數、千粒重、單株產量、小區(qū)產量和含油量，用數量遺傳

3、學的方法研究其主要研究遺傳多樣性。本研究結果如下：
　　 (1)不同材料出胚率：19份材料(基因型)中有16份均可出胚，不同材料間出胚率差異很大，平均每蕾產胚量在0～10.51個之間，其中，780(R)×107-2和小帳120產胚率最高,分別達到10.51和4.43個/蕾。
　　 (2)不同取材部位(主枝與分枝)產胚率的差異：分枝的每蕾產胚數大部分都高于其主枝。
　　 (3)低溫處理對成苗率的影響：同一材料小孢子

4、胚分別4℃低溫處理0d，10d，20d。其中低溫處理10d成苗率最高，分別達到53.7％和44.6％，比對照分別高出32.5％和19％。同一材料2℃低溫處理10d成苗率高于4℃低溫處理10d的成苗率。
　　 (4)利用30對SSR引物進行PCR擴增，1～31DH系和32～62DH系分別擴增出82、80個多態(tài)性片段，其中多態(tài)性位點分別占總擴增位點的75.2％和74.1％，片段大小介于120～900bp之間。每對引物在不同品系間的等

5、位基因數在2～9之間,平均位點為3.63個。1～31DH系PIC(位點多態(tài)性信息含量)變幅為0.06～0.85,平均為0.60；32-62 DH系PIC變幅為0.06～0.86平均為0.56。聚類分析說明：通過小孢子培養(yǎng)獲得的DH系具有豐富的遺傳多樣性，并且來自不同組合的DH系的遺傳差異大于同一組合的DH系的遺傳差異。
　　 (5)SSR標記1～31DH系之間的遺傳距離主要集中在0.2～0.4和0.4～0.6兩個范圍內，占總數的

6、63.6％，而0.4～0.6范圍內的最多，占全部材料的34.8％。32～62DH系之間的遺傳距離主要集中在0～0.2和0.4～0.6兩個范圍內，占總數的61.7％，而0.4～0.6范圍內的最多，占全部材料的35.5％。
　　 (6)DH系主要農藝性狀的遺傳多樣性分析：在歐式遺傳距離為2.6時，可以分為九個類群；歐式遺傳距離數值主要集中在2.623～4.623，0.623～2.623和4.623～6.623三個區(qū)間，表明大部分種質

7、材料間的遺傳基礎較寬，遺傳多樣性比較豐富,但與SSR分子標記得到的結果不完全一致。
　　 (7)親本144/北山繁所得的31個DH品系的千粒重、單株產量和含油量的變異系數分別為9.18％、15.07％和4.58％，說明有相當大的機會獲得高千粒重、單株產量和含油量材料。
　　 (8)2795-8((⊕))品系與其親本144的含油量差異達到顯著水平，這說明，可以通過小孢子培養(yǎng)技術選育出高組合含油量的品系。
　　 (9

8、)DH群體中，2793-4(⊕)、2786-2(⊕)、2782-6(⊕)、2804-4(⊕)、2767-7(⊕)、2800-4(⊕)、2789-6(⊕)和2798-4(⊕)品系的千粒重為前八名，與其親本144的差異達到顯著水平，與另一親本北山繁的差異達到極顯著水平。這說明，可以通過小孢子培養(yǎng)技術選育出高千粒重的品系。
　　 (10)DH群體中，2793-4(⊕)品系的單株產量最高，與其親本144的差異不顯著，與另一親本北山繁的差