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文檔簡(jiǎn)介
1、多環(huán)芳烴由于其具有毒性、致突變性和致癌性,易對(duì)環(huán)境和人類(lèi)都具有很大的危害性。環(huán)境激素導(dǎo)致人類(lèi)精子數(shù)目下降、損害動(dòng)物生殖機(jī)能同時(shí)還導(dǎo)致睪丸癌和生殖系統(tǒng)腫瘤增加。雌激素及衍生物為主的類(lèi)固醇激素是環(huán)境激素的一種,因此兩者引起了世界及越來(lái)越多科學(xué)工作者的關(guān)注。漆酶對(duì)多種污染底物具有降解作用,已有許多關(guān)于植物、細(xì)菌、白腐真菌產(chǎn)漆酶的研究,漆酶可用于降解多種多環(huán)芳烴和類(lèi)固醇激素。鑒于用產(chǎn)漆酶的非白腐真菌降解蒽和類(lèi)固醇激素較少被報(bào)道,本文以課題組保存
2、的FusariumsolaniMAS2為研究對(duì)象,探究其對(duì)多種的單環(huán)芳烴、類(lèi)固醇激素和多環(huán)芳烴的降解能力,以及漆酶基因的克隆表達(dá)。主要結(jié)果如下:
1、菌株F.solaniMAS2能夠降解多種單環(huán)芳烴、多環(huán)芳烴和類(lèi)固醇激素。菌株對(duì)蒽和類(lèi)固醇激素有很好的降解效果,尤其是較難被降解的17β-乙炔基雌二醇(EE2)。
2、將單因素分析及響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì),應(yīng)用于降解蒽及產(chǎn)漆酶的的研究。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用響應(yīng)面分析法建立蒽
3、降解效率和產(chǎn)漆酶效率的二次多項(xiàng)數(shù)學(xué)模型,并驗(yàn)證了模型的有效性。分析不同培養(yǎng)環(huán)境對(duì)降解蒽的影響,單因素試驗(yàn)表明,在以下環(huán)境中降解蒽的效果較佳:蒽的初始濃度50mg/L、培養(yǎng)時(shí)間為30天、NaCl9g/L、pH7.5、(NH4)2SO41.5g/L、接種3個(gè)菌塊。為了確定產(chǎn)漆酶菌株最佳的發(fā)酵條件,通過(guò)Box-Behnken法設(shè)計(jì)了響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)對(duì)培養(yǎng)基中的溫度、pH和蒽的初始濃度進(jìn)行了產(chǎn)漆酶優(yōu)化,獲得較佳的培養(yǎng)條件20℃、pH6.5and30m
4、gl-1,漆酶的產(chǎn)量比原來(lái)的(25℃,pH5.5and50mgl-1,0.52Umgprotein-1/4.11Uml-1)增加了38.9倍。
3、通過(guò)生物量、產(chǎn)酶量和降解率分析F.solaniMAS2降解四種類(lèi)固醇激素的降解能力,同時(shí)對(duì)降解EE2的培養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行探究。單因素試驗(yàn)表明,以下培養(yǎng)條件有較好的降解效果:NaCl24g/L、pH7.5、MgCl2·6H2O2.5g/L、(NH4)2SO42g/L、K2HPO4·3H2O
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