1、一氧化碳中毒動物模型復制和形態(tài)學技術實驗,形態(tài)學中心實驗室,賈雪梅,1.掌握形態(tài)學實驗技術基本方法和技能 2.熟悉一氧化碳中毒模型復制的基本程序3.熟悉實驗論文撰寫的方法與步驟4.了解圖像分析和激光共聚焦顯微鏡技術應用,目的和要求,實驗內容,通過一氧化碳中毒實驗,了解復制動物模型基本過程；通過尼氏體染色，觀察一氧化碳中毒對動物大腦皮質神經元結構的影響；通過免疫組化染色，觀察一氧化碳對神經元內神經營養(yǎng)因子活性的影響；通過圖像

2、分析，對免疫組化染色結果進行定量分析。,技術路線,實驗組 對照組 取材 石蠟包埋 切片 Nisslbody染色 免疫組織化學染色 共聚焦顯微鏡 圖像分析技術,,,,,一氧化碳中毒模型復制,未處理,,,,,

3、,,一氧化碳中毒實驗,目的和要求,1．熟悉一氧化碳中毒實驗方法及 操作技巧。2．掌握一氧化碳吸入所致大腦皮層 結構的形態(tài)學變化。,原 理,一氧化碳中毒，紅細胞內血紅蛋白與一氧化碳結合，而與氧結合能力降低，進而導致組織缺氧。 腦組織缺氧可導致腦體積增大，腦溝變淺，腦回增寬，切面見點狀出血；小灶狀壞死；神經元變性、壞死；小膠質細胞增生、腫脹、吞噬脂質而呈泡沫狀等一系列病理變化。,材 料,1．動物：小鼠或大鼠

4、； 2．器材：手術刀、手術剪、解剖鑷、 試管、廣口瓶、制做切片的系列 儀器和設備；3．試劑：一氧化碳；,操作步驟,1．將動物分為2組， 把小鼠放入廣口瓶內；,2．實驗組動物： 給予一氧化碳吸入，待小鼠出現明顯呼吸困難、煩躁、暈厥時開瓶塞，使小鼠蘇醒； 對照組動物： 不吸入一氧化碳；,3．第二天重復上述操作， 連續(xù)四天， 致小鼠急性中毒死亡；,4. 切開小鼠皮膚， 用鉗子打開顱骨，