1、前列腺癌基因治療,中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院張潤順 宋豎旗,主要內(nèi)容,流行病學(xué) 解剖 病理生理 病因 診斷 癥狀 治療,流行病學(xué),前列腺癌是老年男性常見的惡性腫瘤，95％以上得到確診的病例在45-89歲之間，平均年齡為72歲，并隨著年齡的增長而增加。,解 剖,,病理生理,病 因,前列腺癌早期病變與癌細胞中cdc37基因表達增加， 可能是癌變開始的重要步驟。 抑癌基因的失活或缺失 雄激素

2、受體CAG微小重復(fù)區(qū)的長度與該病的發(fā)展 有潛在的關(guān)系,膀胱出口梗阻癥狀轉(zhuǎn)移癥狀,癥 狀,DREPSA前列腺穿刺活檢,診 斷,治 療,隨訪觀察 藥物治療 手術(shù)治療 放、化療 基因治療,載體系統(tǒng)基因?qū)氲耐緩?基因治療的靶向特異性基因治療策略,基因治療,載體系統(tǒng),病毒載體,逆轉(zhuǎn)錄病毒,腺病毒,腺相關(guān)病毒,單純皰疹病毒,痘病毒,非病毒載體,裸露的DNA,脂質(zhì)體,基因槍,分子偶聯(lián)載體,逆轉(zhuǎn)錄

3、病毒載體,逆轉(zhuǎn)錄病毒（RV）載體是目前研究最透徹的一種病毒載體。逆轉(zhuǎn)錄病毒是單鏈二倍體RNA病毒，依賴其env基因編碼的病毒表面衣殼蛋白與細胞表面特異性蛋白受體結(jié)合進入靶細胞，之后由病毒pol基因編碼的病毒逆轉(zhuǎn)錄酶將病毒RNA 逆轉(zhuǎn)錄為雙鏈DNA，病毒DNA 進入分裂細胞胞核，進而隨機整合到宿主細胞DNA。,腺病毒,腺病毒（Ad） 是前列腺癌科學(xué)研究中最常用的載體，它是雙鏈DNA 病毒，分子量大約為36Kb。通過與細胞表面的受體

4、結(jié)合，腺病毒進入細胞漿內(nèi)，自內(nèi)質(zhì)體釋放，病毒基因轉(zhuǎn)位到細胞核開始基因復(fù)制表達。,腺相關(guān)病毒,腺相關(guān)病毒（A-AV）載體 腺相關(guān)病毒是一組對人類無致病性的單鏈DNA 病毒，與細胞表面的硫酸肝素結(jié)合進入胞漿，在輔助病毒（如腺病毒或單純皰疹病毒）同時存在的條件下，腺相關(guān)病毒才能完成病毒復(fù)制。,單純皰疹病毒載體,單純皰疹病毒（HSV）載體 單純皰疹病毒是雙鏈DNA病毒，分子量約為150Kb。病毒糖蛋白gB和gD與細胞表面的硫酸肝素殘

5、基結(jié)合進入胞漿。單純皰疹病毒能長期潛伏在人體內(nèi)，當(dāng)機體免疫狀態(tài)下降時啟動病毒復(fù)制而致病 。,痘病毒,痘病毒 一組雙鏈DNA病毒，包括牛痘病毒和金絲雀痘病毒。由于痘病毒DNA中含有缺陷胸苷激肽酶，感染痘病毒后，病毒將優(yōu)先在腫瘤細胞中復(fù)制。 其他病毒載體 桿狀病毒和乳頭瘤病毒,非病毒載體,裸露的DNA將純化的閉環(huán)DNA直接注入腫瘤內(nèi)是最簡單的基因表達系統(tǒng)。注入后，DNA就被帶入細胞進入細胞核內(nèi)，在附著體表達或整合到宿主基

6、因組中去，這一過程叫轉(zhuǎn)染。骨骼肌是高效被轉(zhuǎn)染的組織，研究表明，直接注入骨骼肌的DNA可以進入肌細胞，并持續(xù)表達一年 脂質(zhì)體：脂質(zhì)體是由包含多種物質(zhì)包括DNA的雙層磷脂膜組成的環(huán)型封閉囊泡，可被細胞內(nèi)吞而使基因轉(zhuǎn)入細胞中,非病毒載體,金屬顆粒包裹的DNA用基因槍（一種顆粒轟擊技術(shù)）注入金屬顆粒包裹的DNA可以大大提高轉(zhuǎn)染腫瘤細胞的效率。分子偶聯(lián)載體：大量的非脂質(zhì)的陽離子聚合物與DNA形成復(fù)合物，促進細胞內(nèi)的表達。,基因?qū)氲耐緩?目的

7、基因的有效導(dǎo)入是基因治療成功的前提之一前列腺癌瘤體內(nèi)注射、靜脈注射、皮下注射、肌肉注射及皮內(nèi)注射的選擇應(yīng)根據(jù)患者的病情和載體及治療的靶基因的特點來選擇促進癌細胞凋亡或腫瘤自殺基因治療的基因治療多采用直接前列腺癌瘤體內(nèi)注射。而針對前列腺癌的免疫基因治療可以選擇皮下、皮內(nèi)或肌肉注射,基因治療的靶向特異性,組織特異性啟動子可驅(qū)動目的基因在靶器官或組織中特異性表達,實現(xiàn)基因治療的靶向性。數(shù)種前列腺組織特異性啟動子已應(yīng)用于前列腺癌的實驗治療中

8、。有的啟動子甚至僅在前列腺癌組織中表達,對正常前列腺組織毒副作用很小。如PSA、PS2MA、KLK3 ( human prostate specific kalikrein3) 啟動子等。,基因治療策略,基因矯正治療細胞減數(shù)基因治療免疫調(diào)節(jié)基因療法,基因矯正治療,基因改變分為二種 一種是腫瘤生長抑制基因，即抑癌基因；另一種是促進腫瘤生長的基因，即癌基因。矯正基因治療就是恢復(fù)那些突變或被刪除的抑癌基因和拮抗癌基因的功能?；?/p>

9、復(fù)抑癌基因的功能：這種方法的基因靶向包括p53、Rb、p16、p21和CAMs 抑制癌基因的功能：基因突變會導(dǎo)致癌基因的激活，促進腫瘤生長或逃避正常凋亡程序。癌基因包括：ras、myc、erbB2 和bcl-2,細胞減數(shù)基因治療,細胞減數(shù)基因治療是通過轉(zhuǎn)移能直接殺死癌細胞的基因或通過增強癌細胞對藥物或放射線的敏感性或剝奪癌細胞的血供來間接殺死癌細胞,免疫調(diào)節(jié)基因療法,大多數(shù)免疫調(diào)節(jié)基因治療的研究主要集中在轉(zhuǎn)移細胞因子基因來刺激抗原遞