1、微生物實驗思考題1、用油鏡觀察時應(yīng)該注意哪些問題？在載破片和鏡頭之間加滴什么油？起什么作用？答：應(yīng)該先用擦鏡紙將鏡頭擦干凈應(yīng)該先用擦鏡紙將鏡頭擦干凈以防上次實驗的污染以防上次實驗的污染.操作時操作時先低倍再高倍先低倍再高倍.用完要擦掉用完要擦掉油.加滴香柏油。作用：增加加滴香柏油。作用：增加折光率折光率也就是增加了顯微鏡的分辨率也就是增加了顯微鏡的分辨率.2、根據(jù)實驗體會，談?wù)剳?yīng)如何根據(jù)所觀察微生物的大小，選擇不同的物鏡進行有效的觀察。

2、答：細菌用油鏡細菌用油鏡真菌用高倍鏡真菌用高倍鏡.都是先用低倍鏡找到目標后都是先用低倍鏡找到目標后再用高倍鏡調(diào)到合適的視野和再用高倍鏡調(diào)到合適的視野和合適的清晰度合適的清晰度.放線菌、酵母菌、多細胞真菌相對較大，用放大放線菌、酵母菌、多細胞真菌相對較大，用放大40倍的物鏡就可以倍的物鏡就可以看了，細菌小，看了，細菌小，要用放大要用放大1000倍的物鏡看，感覺還很小。病毒那就要用電子顯微鏡倍的物鏡看，感覺還很小。病毒那就要用電子顯微鏡看了

3、?？戳恕?、哪些環(huán)節(jié)會影響革蘭氏染色結(jié)果的正確性？其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是什么？答：涂片環(huán)節(jié)、加熱固定環(huán)節(jié)、脫色環(huán)節(jié)涂片環(huán)節(jié)、加熱固定環(huán)節(jié)、脫色環(huán)節(jié)；其中最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)是脫色環(huán)節(jié)。脫色環(huán)節(jié)。4、進行革蘭氏染色時，為什么特別強調(diào)菌齡不能太老，用老齡細菌染色會出現(xiàn)什么問題？答：著色不均，染色效果不好。陰性陽性不明顯分不太清楚著色不均，染色效果不好。陰性陽性不明顯分不太清楚問題是：不便于顯微鏡下觀察問題是：不便于顯微鏡下觀察是陽性菌還是陰性菌。是陽性

4、菌還是陰性菌。5、革蘭氏染色時，初染前能加碘液嗎乙醇脫色后復(fù)染之前，革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌應(yīng)分別是什么顏色答：不可以。因為碘與染料會結(jié)合成大分子，使得染料分子不能穿過細胞的細胞壁，對實不可以。因為碘與染料會結(jié)合成大分子，使得染料分子不能穿過細胞的細胞壁，對實驗結(jié)果造成影響。脫色后復(fù)染前，革蘭氏陽性菌呈紫色，陰性菌無色驗結(jié)果造成影響。脫色后復(fù)染前，革蘭氏陽性菌呈紫色，陰性菌無色。6、不經(jīng)過復(fù)染這一步，能否區(qū)別革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌

5、？答：不行。在復(fù)染之前，革蘭氏陰性菌是無色透明的，在顯微鏡下很難觀察到；或者脫色不行。在復(fù)染之前，革蘭氏陰性菌是無色透明的，在顯微鏡下很難觀察到；或者脫色答：高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在沸點不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達的壓力下，鍋內(nèi)溫度達1

6、21℃。在此蒸在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。操作方法：加水操作方法：加水——裝料、加蓋裝料、加蓋——排氣排氣——升壓、保壓、和降壓升壓、保壓、和降壓——取料取料14.高壓蒸汽滅菌時應(yīng)注意哪些事項？答：第一，無菌包不宜過大，不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對流易滲透到包裹第一，無菌包不宜過大，不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對流易滲透到包裹中央。第二，布類

7、物品應(yīng)放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。中央。第二，布類物品應(yīng)放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻礙蒸阻礙蒸汽進入包裹中央，嚴重影響滅菌效果。第三，定期檢查滅菌效果。汽進入包裹中央，嚴重影響滅菌效果。第三，定期檢查滅菌效果。15.試述如何在接種中，貫徹?zé)o菌操作的原則答：保持操作臺的無菌狀態(tài)與在無菌室操作；操作前，要進行手的消毒；接種環(huán)要加熱滅保持操作臺的無菌狀態(tài)與在無菌室操作；操作前，要進行手的消

8、毒；接種環(huán)要加熱滅菌；接種物品要標記。菌；接種物品要標記。16.以斜面上的菌種接種到新的斜面培養(yǎng)基為例說明操作方法和注意事項。答：在接種箱或者超凈工作臺上在接種箱或者超凈工作臺上.將母種經(jīng)過消毒處理以后將母種經(jīng)過消毒處理以后在酒精燈火焰區(qū)上方打開棉塞在酒精燈火焰區(qū)上方打開棉塞.用接種針挑取一小塊菌絲體用接種針挑取一小塊菌絲體接入新的試管培養(yǎng)基上即可接入新的試管培養(yǎng)基上即可.17.試設(shè)計一個實驗，從土壤中分離酵母菌并進行計數(shù)。答：無標準答